分析化学课件-第2章 吸光光度法.pptxVIP

第2章 吸光光度法2-1 概 述比色分析：根据颜色深浅的不同确定待测组分浓度的分析方法红目视比色法橙紫分 类 比色分析法蓝黄分光光度法 10-5~10-6 mol/L；2~5%绿青蓝蓝绿2-2 物质对光的选择性吸收第2章 吸光光度法二 最大吸收波长的选择λmax 6×１０－４１）生成的络合物对不同λ的光 吸收程度不同 ４×１０－４ΔA２）不论Fe2+的浓度如何，最大吸 收波长λmax不变 ２×１０－４ΔAΔA′ΔA′3）在λmax，测量的灵敏度和准确 度最高邻菲罗啉- Fe2+溶液的吸收曲线透射光强度入射光强度I0I第2章 吸光光度法b透光度吸光度Sb第2章 吸光光度法2-3 光吸收的的基本定律(Basic law of light adsorption)一、朗伯比尔定律(Lambert-Beer law)dx入射光的强度透射光的强度I0I第2章 吸光光度法摩尔吸光系数，仅与有色溶液的性质以及入射光波长有关讨论：第2章 吸光光度法第2章 吸光光度法ε的物理意义：摩尔吸光系数，液层厚度为1 cm，浓度为1 mol/L时溶液的吸光度；单位 L/cm. mol；仅与溶液的性质以及入射光的波长有关，而与溶液的浓度无关；它代表有色溶液反应的灵敏程度；通常在103~105之间。 ε与a的关系： ε=aMA=abC’C’=CMa=A/bCM=ε/Mε=aM例 在λmax=508 nm，b=2 cm下测定C=500 μg/L，Fe2+与邻菲罗啉生成的橙色络合物的吸光度A=0.20，计算表观摩尔吸光系数ε和吸光系数a？第2章 吸光光度法入射光的总强度二、偏离朗伯比尔定律的原因1、单色光不纯引起的偏离透射光的总强度谱带A谱带B第2章 吸光光度法谱带A作入射光谱带B作入射光复合光对朗伯比尔定律的影响2、化学因素引起的偏离[思考题与练习题]一 选 择与填空1、可见分光光度计的测量范围是 A 400-800nm B 200-320nm C 200-800nm D 200-1000nm√2、影响有色物质摩尔吸光系数的因素是A 吸收池厚度B 入射光波长C 有色物质溶液的浓度D 入射光的强度√3、某有色物质溶液，遵守朗伯比尔定律，当其浓度为c 时，用1.00cm比色皿测得其 透光度为T，当浓度减小为0.50 c 时，在同样条件下测定，其透光度应为 A T 2 B 2T C √ D T/24. 下列哪一因素不是引起偏离朗伯比尔定律的原因 A.单色光不纯B.高浓度溶液C.稀溶液D.吸光粒子间发生缔合 √[思考题与练习题]5. 目视比色法中，常用的标准系列法是比较： A 入射光的强度B 透过溶液后的光强度 C 一定厚度溶液的颜色深浅D 溶液对白光的吸收情况 √6. 符合比尔定律的有色溶液稀释时，其最大吸收波长λmax A 不变B 变小C 变大D 无法确定√7. 在选择的λmax下用1cm比色皿测定Fe2+邻二氮杂菲有色络合物透光T=0.56，其吸光度A=( )；若该有色溶液浓度为5.58×10-4g/L（Fe=55.8）, 则ε=( )； 若溶液浓度为原来的1/2而用2cm比色皿测定其T=（ ）。0.2522.5 ×1040.56第2章 吸光光度法目视比色法比色分析法最灵敏、最准确分 类 分光光度法2-4 比色分析的方法和仪目视比色法0 mL1 mL2 mL3 mL4 mL5 mL6 mL第2章 吸光光度法2、光电比色及分光光度计目视单色器比色池检测系统比色计光 源比色计：滤光片分光光度计：棱镜或光栅第2章 吸光光度法分光光度计内部光的传播途径第2章 吸光光度法TU-1901 紫外分光光度计SP-752 紫外分光光度计超微量分光光度计第2章 吸光光度法二、主要部件作用原理6~12 V钨丝灯；稳压电源。滤光片、棱镜、光栅光电转换装置、检流计光学玻璃、石英玻璃光 源单色器吸收池检测系统1、光 源要求：1）能发出400~800 nm的可见光2）光源发出的光要有足够的强度和稳定性2、单色器（1）滤光片CD第2章 吸光光度法红橙紫蓝黄绿青蓝青选择原则：滤光片最大透光应是有色溶液最大吸收的光，即滤光片的颜色应与有色溶液的颜色互补。半宽度：最大透光度一半处曲线的宽度，一般约为30~100 nm。第2章 吸光光度法（2）棱 镜法线δ3δ2δ1λ3λ1λ2 λ3λ2λ1棱镜的单色性远优于滤光片，其半宽度约为5~10 nm；玻璃棱镜：400~750 nm的可见光；石英棱镜：400 nm以下的紫外光。第2章 吸光光度法（3）光 栅光程差光谱级数:0,1, 2, ….10000入射波长1 cm波长越短，衍射角越小，光谱越靠近0级光谱；玻璃光栅：400~750 nm的可见