DB64 767_2012  动物疫病样品采集技术规范.docx

ICS 65.020.30 B 41 宁 夏 DB64 回 族 自 治 区 地 方 标 准 DB 64/T 767—2012 动物疫病样品采集技术规范 2012-03-20发布 2012 - 03 - 20实施 宁夏回族自治区质量技术监督局 发布 DB64/ T 767—2012 前 言 本标准的编写格式符合GB/T1.1-2009 《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的要求。 本标准由宁夏回族自治区农牧厅提出并归口。 本标准由宁夏回族自治区动物疾病预防控制中心起草。 本标准主要起草人：王晓亮、王进香、李知新、周海宁、周秀玲、吴顺祥、玉贵萍、张学军。 工 1 DB64/ T 767—2012 动物疫病样品采集技术规范 1 范围 本标准规定了动物疫病检验样品采集技术规范的术语和定义、样品采集原则、样品采集前的准备、 样品采集、样品处理、样品的包装及废弃物处理、样品记录、样品保存、样品运送。 本标准适用于动物疫病病原学、病理组织学、血清学、免疫学等实验室检验所需样品的采集。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 16548 病害动物和病害动物产品生物安全处理规程 GB/T 18635-2002 动物防疫基本术语 NY/T 541-2002 动物疫病实验室检验采样方法 《兽医实验室生物安全技术管理规范》 (中华人民共和国农业部公告2003年第302号) 《病原微生物实验室生物安全管理条例》 (中华人民共和国国务院令2004年第424号) 《高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范》(中华人民共和国农业部公告2005 年第503号) 3 术语和定义 GB/T 18635-2002规定的以及下列术语和定义适用于本标准。 采集 通过一定的方法，按照特定的程序和要求，对样品进行收集、处理及整理的过程。 4 样品采集原则 4.1 遵循适时、典型、无菌、适量和生物统计的原则。 4.2 发现疑似炭疽，不得解剖。 4.3 根据不同的检验要求进行样品采集，包括相应的组织器官、内容物、分泌物、排泄物或其它材料。 4.4 无法估计病因时，应对组织器官、分泌物和排泄物等进行全面的采集。 4.5 患畜(禽)已死亡，应尽快采集样品，夏天不得超过6h, 冬天不得超过24h。 4.6 采样应符合NY/T541-2002 的规定。 5 样品采集前的准备 5.1 人员要求 2 DB64/ T 767—2012 熟悉动物防疫的有关法律规定，具有一定的专业技术知识，熟练掌握采样工作程序和采样操作技术。 采样时不得少于2人。 5.2 器具和试剂 5.2.1 容器具 采样箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器、针头、试管 架、塑料盒、铝盒、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋、平皿、2.0mL塑料离心管、15mL离心管、 易封口样品袋、塑料包装袋等。 5.2.2 器材无菌处理 金属器械可采用高压、干热、煮沸消毒30min。临用时75%酒精擦拭，或用时进行火焰消毒；器皿(玻 制、陶制等)经103kPa高压30min,或160℃干烤2h灭菌，或经0.5%～1%碳酸氢钠溶液中煮沸10min～15min, 再用无菌纱布擦干，无菌保存备用。 5.2.3 试剂 根据所采样品的种类和要求，准备不同类型的存放试剂，如PBS缓冲液、30%甘油缓冲液等。 5.3 记录和防护材料 采样单、不干胶标签、圆珠笔、记号笔、记录本、口罩、 一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、 护目镜、胶鞋等。 6 样品采集 6.1 血样 6.1.1 采血部位 猪、牛、羊、马采用颈静脉、前腔静脉、耳静脉、尾静脉或颈外静脉、乳房静脉采血。 毛皮动物小量采血可穿刺耳尖或耳廓外静脉，多量采血可在隐静脉采集或划破趾垫0.5cm 深度或剪断尾尖部采血。 啮齿类动物尾尖采血或眼窝的血管丛采血。 兔耳背静脉、颈静脉或心脏采血。 禽类翅静脉采血或心脏采血。 6.1.2 处理 全血 样品中需加入抗凝剂，可用0.1%肝素钠或阿氏液或3.8%枸橼酸钠，血液与抗凝剂应充分混合均匀。 脱纤血 在容器内加入适量小玻珠，加入血液后，反复振荡，待纤维蛋白凝固后，取脱纤血经密封后贴上标 签，保持冷藏状态立即送实验室。 血清 3 DB64/