DB64 728_2011  马铃薯脱毒快繁技术规程.docx

ICS 65.020.20 B05 宁 夏 DB64 回 族 自 治 区 地 方 标 准 DB 64/T 728—2011 马铃薯脱毒快繁技术规程 2011-12-18发布 2011-12-18实施 宁夏回族自治区质量技术监督局 发布 I DB64/ T 728—2011 前 言 本标准的编写格式符合GB/T1.1-2009 《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的要求。 本标准由北方民族大学提出 本标准由宁夏回族自治区农牧厅归口。 本标准由北方民族大学起草。 本标准主要起草人：曹君迈、陈彦云、郭荣、陈建荣、张欣、王薇、贝盏临、雷茜、祁金涛、冯佩、 马登华。 DB64/ T 728—2011 马铃薯脱毒快繁技术规程 1 范围 本标准规定了马铃薯脱毒快繁技术规程的术语定义、母株选择、入选材料病毒初检、培养基的配制、 外植体的制备及置床、再生植株的形成及的病毒检测、再生植株的扩繁、终检及无毒苗的扩繁。 本标准适用于马铃薯脱毒快繁的生产管理与操作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB18133 马铃薯脱毒种薯 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 脱毒苗 选用分生组织做外植体通过植物组织培养技术获得的再生试管苗，经检测符合GB18133病毒检测要 求。 3.2 植物组织培养 在适宜的人工培养基上和无菌条件下对植物离体器官、组织或细胞(包括原生质体)进行培养，使之 诱发产生组织或者长成完整植株的一种实验技术。 3.3 分生组织 具有细胞分裂能力的植物细胞群。 3.4 外植体 用来进行无菌培养的离体材料。 注：可以是器官、组织、细胞和原生质体或用于继代培养的组织培养物。 3.5 2 DB64/ T 728—2011 继代培养 初代培养产物转入继代培养基上，使愈伤组织分化出丛生芽、不定芽继续增殖、胚状体发育成完整 植株的过程。 3.6 组培快繁 在较短的时间内，利用植物组织培养技术生产出大量的优质种苗。 4 母株选择 4.1 以茎尖为脱毒材料的取材方法 对确立要脱毒的马铃薯品种，进行田间种植观察。在开花期，选择生长健壮，具有本品种典型特征、 特性的单株做为初选材料挂牌，收获后对其经济性状表现优良的薯块，做为入选材料。 4.2 以芽尖为脱毒材料的取材方法 对确立要脱毒的马铃薯品种，进行田间种植观察。在始花期，选择生长健壮，具有本品种典型特征、 特性的单株做为初选材料挂牌，并在晴天温度较高时，每株取30个约1cm长的芽尖，依次编号，放入保鲜 盒内，带入实验室进行检测。 5 入选材料病毒初检 5.1 以茎尖为脱毒材料的初检 对入选材料，按GB18133 的规定先进行PSTVd检测，随后进行其它病毒的检测，对无规定病毒种类的 材料入选进入下一程序。 5.2 以芽尖为脱毒材料的初检 对所取的材料留芽尖0.5 cm长部位备用，其余部分按GB18133的规定进行病毒检测，对未规定病毒 种类的材料入选进入下一程序。 6 培养基的配制 6.1 培养基母液的配制 按表1要求配制培养基母液。 表1 MS 培养基母液的配置 母液编号 化合物名称 标准用量 (mg/L) 扩大倍数(倍) 称取量(mg) 母液定容体积 (ml) 1升培养基吸 取量(ml) 母液1 KNO? 1900 100 190000 5种盐分别充 分溶解后混合 定溶至1000ml 10 NH?NO? 1690 100 169000 3 DB64/ T 728—2011 表1(续) 母液编号 化合物名称 标准用量 (mg/L) 扩大倍数(倍) 称取量(mg) 母液定容体积 (ml) 1升培养基吸 取量(ml) 母液1 KH?PO? 170 100 17000 5种盐分别充 分溶解后混合 定溶至1000ml 10 MgSO.7H?O 370 100 37000 CaC1?.2H?O 440 100 44000 母液2 MnSO?.4H?O 22.3 100 2230 7种盐分别充 分溶解后混合 定溶至1000ml 10 ZnSO.7H?O 8.6 100 860 H?BO? 6.2 100 620 KI 0.83 100 83 NaMo.2H?O 0.25 100 25 CuSO.5H?O 0.025 100 2.5 CoCl.6H?O 0.025 100 2.5 母液3 Na?-EDTA 37.3 100 3730 2种盐分别充 分溶解后混合 定溶至1000ml 10 FeSO.7H?O 27.0 100 2780 母液4 廿氨酸 2 100 200 4种有机物