生物化学教学核酸的生物合成演示文稿.pptxVIP

生物化学教学核酸的生物合成演示文稿; 第 十 章;第一节 DNA的生物合成;;;半保留复制;参考;;关于“模板”的定义;;二．复制的单位;;2．复制叉;;3．原核生物染色体DNA只有一个复制子; E.coli的DNA复制一次需40min。 但在迅速生长的原核生物中，第一次复制尚未完成，第二次复制就在同一个始点上开始，从而，使原核生物可以用更快的速度繁殖。;就单个的复制叉的移动速度而言，原核生物的较真核生物的移动要快; 在真核生物染色体的不同位置上有多个复制起点，如在30000个碱基对长的果蝇染色体DNA上有2000——3000个复制起点。 从这些起始点开始向相反方向复制，就形成多个复制泡。 这一状况已用电子显微镜观察得到证实。;;（二）复制的方向;;;三． 原核生物DNA的复制（DNA 指导下的DNA合成）;1. DNA的聚合反应的条件;2. 聚合反应;3． 聚合反应的机理;第27页/共161页;4． 聚合反应的特点;;（二）DNA聚合酶;The search for an enzyme that could synthesize DNA began in 1955. Work by Arthur Kornberg and colleagues led to the purification and characterization of DNA polymerase from E. coli cells, a single-polypeptide enzyme now called DNA polymerase I (Mr 103,000; encoded by the polA gene). Much later, investigators found that E. coli contains at least four other distinct DNA polymerases. ;;b． 3`—5`核酸外切酶活性;;该酶的3`——5`外切酶活性只对单链而不是双链的3`-端起作用;;c. 5`—3`核酸外切酶活性从5`端向3`端水解DNA 链而得到核苷酸或寡核苷酸;d. 将DNA聚合酶 I 用枯草杆菌蛋白酶或胰蛋白酶有限水解;;DNA聚合酶 II只有一条多肽链，分子量120，000;3. DNA聚合酶 III;第42页/共161页;原核生物;第44页/共161页;? 滞后链合成的模板形成环，复制叉上的二聚体DNA聚合酶Ⅲ全酶同时合成两条子链。;（三）DNA连接酶 DNA聚合酶只能催化DNA链的合成延长，并不能催化DNA 链之间的连接;;;;;第51页/共161页;（四）DNA的半不连续复制;;第54页/共161页;;;;（2） 冈崎片段;2． 冈崎片段和引物RNA合成;;; （2） 冈崎片段和滞后链的形成;;3． DNA 双链的分离;（2） 单链结合蛋白（SSB）;;（3）DNA旋转酶（Gyrase）;（4）DNA复制体（Replisome）;关于 ??? 制 的 终 止（参考）;;;第72页/共161页;四． 真核生物DNA的合成;真核生物的DNA聚合酶; 真核生物中真正负责复制作用： DNA聚合酶-α，δ;;关于DNA序列的测定——酶法;;;;;;;PCR技术的原理;第二节 DNA的损伤与修复;（二） 光复活修复;;;;;二．切除修复;;第三节 细菌的限制（聚）——修饰系统;二．细菌的修饰作用;三．细菌的限制——修饰系统;第四节 RNA的生物合成;（二） 原核生物的转录特点;;6 ． 转录时的聚合反应;7 ． 只以双链DNA中的一条单链作为模板进行转录;;;（三） RNA聚合酶的组成与功能;;第105页/共161页;2 ．各亚基的功能;;原核生物的RAN聚合酶;（5）核心酶的功能;;;参考;（四） 转录的过程;;模板与酶的辨认结合;第116页/共161页;;（3）抗终止因子;（4）终止子的类型;;第121页/共161页;b ．依赖于rho（ρ）的终止子;;3 ． RNA聚合酶催化的转录过程;;第126页/共161页;;（2） 延伸;第129页/共161页;;; ;;; 实验表明，大肠肝菌RNA聚合酶以大约每秒钟50-90个核苷酸的速度合成mRNA。  RNA聚合酶缺乏核酸外切酶活性，不具备核对功能，因此RNA转录的准确性比DNA复制（误差率约在10-9-10-10）要求低得多，其误差率约在10-4-10-5范围内。;（