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- 2023-06-21 发布于上海
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氨基酸的薄层层析实验第1页/共6页
2023/6/172实验十二 氨基酸的薄层层析第1页/共5页第2页/共6页
2023/6/173一、实验目的 掌握氨基酸的薄层层析的方法和原理,学会分析未知样品的氨基酸成分。二、原理 滤纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析,滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂为流动相。有机相流经固定相支持物时,与固定相之间连续抽提,使物质在两相间不断分配而得到分离。溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示: Rf = 物质结构、溶剂系统的物质组成等因素都会影响Rf值。 原点到层析斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离第2页/共5页第3页/共6页
2023/6/174三、试剂和器材 1. 试剂 0.5%茚三酮溶液、标准氨基酸溶液 溶剂系统: 正丁醇-88%甲酸-水(15:3:2,V/V) 2. 器材 层析缸、毛细管、电吹风四、操作步骤 如下页所示。第3页/共5页第4页/共6页
2023/6/175操作流程:点样层析显色滤纸一边1.5厘米处划线,在线上等距离划6个点毛细管吸样品(约2cm高)点样,直径小于0.5cm,电吹风吹干,重复一次。干燥后将滤纸卷
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