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实验十一水中细菌总数的测定第一页,共十页,2022年,8月28日
一、实验目的1.学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。2.了解水源水的平板菌落计数的原理。第二页,共十页,2022年,8月28日
二、实验原理本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多,它们对营养和其他生长条件的要求差别很大,不可能找到一种培养基在一种条件下,使水中所有的细菌均能生长繁殖,因此,以一定的培养基平板上生长出来的菌落,计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。第三页,共十页,2022年,8月28日
三、试剂与器材1.试剂: 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,灭菌水。2.器材: 灭菌三角瓶,灭菌的带玻璃塞瓶,灭菌培养皿,灭菌吸管,灭菌试管等。第四页,共十页,2022年,8月28日
四、实验内容1.水样的采取自来水:自来水龙头灼烧3分钟,放开水龙头流5分钟后接取水样。桶装水:待水流一段时间后接取水样。湖水:取距水面10-15厘米出水样。第五页,共十页,2022年,8月28日
2 细菌总数测定(1)自来水和桶装水取1毫升注入无菌培养皿中做两皿;倒入15毫升45的左右的牛肉膏蛋白胨培养基后混合均匀;另取一空白培养皿做成空白对照;培养基凝固后倒置于37的恒温培养箱中培养24-48小时后计数。第六页,共十页,2022年,8月28日
(2)湖水或池水稀释水样:4.5毫升无菌水+0.5毫升水样做梯度稀释至10-3;取最后三个稀释度的水样1毫升注入2个无菌培养皿,然后倒入15毫升45的牛肉膏蛋白胨培养基混合均匀;37恒温培养24-48小时后计数。第七页,共十页,2022年,8月28日
3 菌落计数方法菌苔不计数;首先选取菌落数在30-300之间稀释度计数,平均菌落数乘于稀释倍数即可;若有两个稀释度的平均菌落数均在30-300之间,按两者比值决定:如小于2,取两者平均数;如大于2,取其中菌落较小者;第八页,共十页,2022年,8月28日
如都大于300,取稀释度较高的平均菌落乘于稀释倍数;如都小于30,取稀释度最小的平均菌落乘于稀释倍数;如都不在30-300之间,取最接近300或30的平均菌落乘于稀释倍数。第九页,共十页,2022年,8月28日
五 实验报告1 结果 P1832 思考题 P184(3)第十页,共十页,2022年,8月28日
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