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基因文库技术;Effects of recombinant human leptin treatment in a child with leptin deficiency. ;第四章 目的基因的分离克隆 ;某生物基因组DNA片段(例如10n个)与载体分子重组，重组DNA转化宿主细胞，转化细胞在选择培养基上长出的单个菌落（或噬菌斑）即为一个DNA片段的克隆。全部片段克隆的集合即为该生物的基因文库。;2 基因文库的分类 ;2）克隆文库和表达文库 ;3）不同载体的文库 ;4）减法文库 减法文库又称扣除文库及精简文库。它是通过野生型DNA与缺失型DNA，或不同时空、不同环境条件的两种cDNA样品反复杂交，去除杂交体后,将剩余的DNA或cDNA片段进行克隆而构建的文库。 5）亚克隆文库 亚克隆文库是将人工染色体文库或粘粒文库中克隆的大片段DNA用鸟枪法(shotgun)随机小片段化，然后用这些随机小片段建立的DNA文库。 ;3 基因文库的构建 ;第10页/共31页;第11页/共31页;第12页/共31页;基因组文库（genomic DNA library）：是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的片段，然后连接到某种载体上转化受体细胞而形成的克隆的集合。 cDNA文库（cDNA library）：是指某生物某一发育时期、某一组织或某种环境条件下所转录的mRNA经逆转录形成的c