中药化学实验指导—实验四槐花米中芸香苷的提取及槲皮素的制备与检识5679.pdfVIP

实验四 槐花米中芸香苷的提取及槲皮素的制备与检识 （一）目的要求 学习黄酮类化合物的提取、分离和检识，通过实验要求： 1．通过芸香苷提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操 作。 2 ．掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的检识方法。 3 ．掌握由芸香苷水解制取槲皮素的方法。 （二）主要化学成分的结构及性质 槐花米为豆科植物槐Sophora japonica L. 的干燥花蕾，主要含芸香苷（芦丁）， 含量高达 12％～20 ％，水解生成槲皮素、葡萄糖及鼠李糖；槐花亦含芸香苷， 但含量较槐米为少。 芸香苷(rutoside) 分子式 C27H30O16 ，分子量 610.51。淡黄色针状结晶， mp.177～178℃，难溶于冷水（1 ∶8000），略溶于热水（1 ∶200 ），溶于热甲醇（1 ∶ 7 ）、冷甲醇（1 ∶100）、热乙醇（1 ∶30 ）、冷乙醇（1 ∶650 ），难溶于醋酸乙酯、 丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中。 槲皮素(quercetin) 又称槲皮黄素，分子式 C H O ，分子量302.23。黄色 15 10 7 结晶，mp.314℃（分解）。溶于热乙醇 （1 ∶23 ）、冷乙醇 （1 ∶300 ），可溶于甲醇、 丙酮、醋酸乙酯、冰醋酸、吡啶等溶剂，不溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿中，几 不溶于水。 OH HO O OH OR OH O 芸香苷 R= －葡萄糖－鼠李糖 槲皮素 R=H （三）实验原理 由槐花米中提取芸香苷的方法很多，本实验是根据芸香苷在冷水和热水中的 溶解度差异的特性进行提取和精制，或根据芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性， 能与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮沸提取，其提取液加酸酸化后则芸香 苷游离析出。 （四）实验内容 1．芸香苷的提取 方法Ⅰ：水提取法 见书 方法Ⅱ ：碱溶酸沉法 见书 2 ．芸香苷的精制 见书 4 ．芸香苷、槲皮素及糖的检识 取芸香苷、槲皮素少许，分别用8ml 乙醇溶解，制成试样溶液，按下列方法 进行实验，比较苷元和苷的反应情况。 （1）Molish 反应：取试样溶液各2ml ，分置于两支试管中，加10％α-萘酚 乙醇溶液1ml，振摇后倾斜试管45 °，沿管壁滴加1ml 浓硫酸，静置，观察并记 录两液面交界处颜色变化。 （2 ）盐酸-镁粉反应：取试样溶液各 2ml ，分别置于两支试管中，各加入镁 粉少许，再加入盐酸数滴，观察并记录颜色变化。 （3 ）醋酸镁反应：取两张滤纸条，分别滴加试样溶液后，加 1％醋酸镁甲 醇溶液2 滴，于紫外灯下观察荧光变化，并记录现象。 （4 ）三氯化铝反应：取两张滤纸条，分别滴加试样溶液后，加 1％三氯化 铝乙醇溶液2 滴，于紫外灯下观察荧光变化，并记录现象。 （5 ）锆-柠檬酸反应：取试样溶液各2ml，分别置于两支试管中，各加2 ％ 二氯氧锆甲醇溶液3～4 滴，观察颜色，然后加入2 ％柠檬酸甲醇溶液3～4 滴， 观察并记录颜色变化。 （6 ）纸色谱检识 支持剂：新华层析滤纸(中速,20CM ×7CM) 试 样：自制芸香苷乙醇溶液 自制槲皮素乙醇溶液 对照品 ：芸香苷对照品 乙醇溶液 槲皮素对照品 乙醇溶液 展开剂：正丁醇-醋酸-水（4 ∶1 ∶5 上层）或15％醋酸溶液 显色剂：1）在可见光下观察斑点颜色，再在紫外灯下观察斑点颜色