金边瑞香脱毒快繁技术规程标准文本.pdfVIP

金边瑞香脱毒苗木繁育技术规程 1　范围 本标准规定了金边瑞香茎尖诱导培养、脱毒组培苗无性系的建立、脱毒试管苗的移栽、脱毒盆苗培 养、脱毒苗扦插繁殖及苗的分类、检疫等。 本标准适用于江西省金边瑞香脱毒快繁和种苗及生产苗生产。 2　规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB 6001-85 育苗技术规程 GB/T 18247.2-2000 主要花卉产品等级 第 2 部分:盆花 《植物检疫条例》 《植物检疫条例实施细则》 《中华人民共和国进出境动植物检疫条例实施细则》 3　术语与定义 3.1　 外植体 explant 植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。 3.2　 培养基 medium 供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物 质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。本文件所指培养基适用于植物培养。 4　技术目标 脱去金边瑞香 5 种病毒，增强植株抗性，达到复壮效果，繁殖高抗性生产苗。 5　苗木分类 原种苗：长根 30 d 的试管苗；移栽成活苗：原种苗长成苗高 6 cm 的移栽苗。种苗：原种苗移栽后 长成的大苗上采条扦插成活的苗。生产苗：种苗上采条扦插成活的苗。 6　技术措施 1 6.1　脱毒试管苗无性系的建立 6.1.1　培养基的配置 6.1.1.1　配置 MS 基本培养基 每升溶液中加入 5-6 g 卡那胶，再加入所需激素种类和浓度，与基本培养基混合搅匀，pH 值调为 5.7-5.8 。 6.1.1.2　装瓶 瓶的大小 220 ml 左右，每瓶装培养基 35.5 ml 。 6.1.1.3　灭菌 封好瓶口后，放进灭菌锅内进行高压灭菌；灭菌的压力为 0.09 MPa ，时间为25 min 。 6.1.2　脱毒 6.1.2.1　外植体处理 选择生长健壮的金边瑞香枝条作为脱毒组培苗的外植体。将嫩芽在自来水下洗净，用 0.1%升汞溶 液浸泡 12 min，无菌水冲洗4～5 次，无菌滤纸吸干水分，切下顶芽，然后在超净台中双筒显微镜下剥 离 0.2-0.3 mm 的茎尖，接种到预先准备好的诱导培养基中，每瓶接种 5 个。茎尖诱导培养需 50-70 d 。 6.1.2.2　茎尖的诱导培养及脱毒检测 由单个茎尖诱导获得的单芽分别转入MS+6-BA 0.5-1 mg/L+NAA0.1 mg/L 的培养基中培养，待长成 2-3 cm 高的试管苗，将茎苗再切成带有一个节的基段，继续在原培养基上培养，然后将来自不同茎尖 生长点的试管苗若干株进行脱毒检测，脱去 5 种病毒的苗可作为脱毒苗进行快速繁殖。 6.1.3　试管苗的无性系培养 6.1.3.1　接种 在超净工作台上，按芽和茎段分别接入转代增殖培养基中，每瓶放 8 个材料；苗直径大于 1.0 mm 以上的试管苗，切下 1.5-2 cm 高的苗则接入 MS+NAA0.5mg/L 的生根培养基中，每瓶 6 个。 6.1.3.2　培养时间 增殖培养每代 50 d；生根培养30 d 。 6.1.3.3　培养温度 增殖培养为 24-26 ℃；生根培养22-24 ℃。 6.2　试管苗移植 6.2.1　炼苗 把要移植的生根瓶苗从培养间取出，放在室温处，打开瓶盖炼苗 1 d，用自来水将根上的琼脂轻轻 洗净，切勿伤根，洗好后即可移植。 6.2.2　基质及配比 2 珍珠岩：泥炭=2 ：1，将珍珠岩、泥炭及 50%的多菌灵 1500 倍液按比例均匀混合，然后装入 6 ×8cm 的容器中待用。将刚洗好的生根苗移入，栽后轻浇水，使基质湿润。 6.2.3　置放 移植苗应置放在有防虫网的棚内；或具备 500 m 以上隔离条件（即500 m 内没有种植传统繁殖的 金边瑞香）的棚内。 6.2.4　小苗管理 6.2.4.1　温度 小苗在棚内一般可正常管理。当棚内温度低于 5℃时，则刚移栽的小苗须加小拱棚保温 15