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生物化学套读9;2023/3/14;发酵热的测定 (1)通过测量一定时间内冷却水的流量和冷却水的进出。 Q发酵=GC(T2-T1)/V Q发酵-----------发酵热;C-------冷却水的比热 G-----------冷却水的流量;T1T2------进出口冷却水的温度; V----------发酵液的体积 (2)通过罐温度的自动控制，先使罐温达到恒定， 再关闭自控装置，测量温度随时间上升的速率S。 Q发酵=(M1C1+M2C2)S/V;(3)根据化合物的燃烧值计算发酵过程中生物热 的近似值。 (4)测定微生物生长代谢中的耗氧量。 通风（耗氧）发酵过程生成的发酵热数量与过程 所消耗的氧是成正比。 QH=(0.106~0.124)QO2≈(1/10)QO2 QO2-------------氧的消耗比速(mmolO2/g菌体.h) QH--------------发酵热生成的比速(kcal/g菌体.h) 当通风发酵出现溶解氧不足时，有的的微生物能 够进行厌氧反应。则出现: QH(0.106~0.124)QO2 ;二. pH的检测和控制 pH值可用耐灭菌的玻璃电极和银-汞参比电极以及pH 测量仪表的检测系统检测，可连续指示罐内酸碱变化。 微生物反应过程中pH的变化具有一定规律。 ①在微生物细胞的生长阶段，由于所用的微生物菌种不同，相对于接种后的起始pH值有上升或下降趋势 ②在生产阶段，一般反应液的pH值趋于稳定，维持在最适合产物形成的范围。 ③在微生物细胞的自溶阶段，随着培养基中的营养物质的耗尽，微生物细胞内蛋白酶的积累和活跃，微生物自溶，引起培养液中的氨基氮等的增加，致使pH值有上升。;引起反应液pH 值下降的主要原因有 1.培养基中的碳/氮比例不当，碳源过多，特别是葡萄 糖过量或者中间补糖过多或溶解氧不足，致使糖等物质 氧化不完全，培养液中有机酸会大量积累，从而使pH值 下降 2. 消泡油加得过多； 3. 微生物生理性物质的存在，使pH值下降。 引起反应液 pH值上升的主要原因有： 1.培养基中的碳/氮比例不当，碳源过多，氨基氮释放 会使pH值上升。 2.生理碱性物质存在。 3.中间补料液中氨水或尿素等碱性物质的加入过多。;1.调节培养基中的原始pH值，或加入缓冲溶液制成缓冲能力强、pH值变化不大的培养基。 2. 可在反应过程中加入弱酸或弱碱进行pH值的调节，进而合理地控制发酵条件，也可通过调整通风量来控制pH值。 3. 进行补料，既调节了培养液的pH值，又可补充营养，增加培养液的浓度和减少阻遏作用，进一步提高产率。 4. 采用酸性铵盐作为氮源时，由于NH4+被利用后，剩下的酸根会引起发酵液中的pH值下降，在培养液中可加入碳酸钙来调节pH值。 5. 根据pH值的变化可用流加氨水的方法来调节，同时又可把氨水作为氮源供给。 6. 以尿素作为氮源进行流加调节pH值。 ;三. 泡沫的影响和控制 太多的泡沫给反应带来不利的影响 1. 使反应器的装填系数减少； 2. 造成大量逃液，导致产物的损失； 3. 泡沫“顶罐”有可能使培养基从搅拌的轴封渗出，增加 了染菌的机会。 4. 由于泡沫的液位变动，以及不同生长周期微生物随泡 沫漂浮，使微生物生长的环境发生了变化，影响了微生 物群体的效果，增加了微生物群体的不均一性。 5. 影响了搅拌的正常进行，妨碍了微生物的呼吸。 6. 使微生物提早自溶。 7. 为了控制泡沫，需加入消泡剂。对产物的提取不利。 ;微生物反应过程产生泡沫的原因 1. 由外界引进的气流被机械地分散形成 2. 反应过程产生的气体聚结生成的泡沫 培养基的物理化学性质对泡沫形成的表面现象起 决定作用，此外，培养基的温度、酸碱度、浓度 等对过程的泡沫也有一定的影响。培养基中的蛋 白质含量越多，反应液的黏度也越大，越容易起 泡，泡沫多而且持久稳定。 ;泡沫的控制 化学消泡 消泡机理：1.消泡剂是表面活性物质，降低气泡表面张力，使气泡破裂2. 降低机械强度（降低液膜的弹性）3.降低膜表面的黏度。 天然油脂类、高级醇类、聚醚类、硅酮类、氟化烷烃等 生产中的一些用法： (1)通过机械搅拌，使消泡剂更易于分散在反应液中。 (2)将消泡剂与载体一起使用，使消泡剂溶于或分散于载体中，比如用聚氧丙烯甘油作消泡剂时，以豆油为载体的消泡增效作用明显。 (3)多种消泡剂并用可增强消泡作用。 (4)使用乳化剂增强消泡剂的消泡作用，如消泡剂聚氧丙烯甘油用吐温-80为乳化剂的增效作用可提高1~2倍。;机械消泡 靠机械强烈振动和压力的变化，促使细胞破裂，或借 助机械力将排出气体中的液体加以分离回收，从而达 到消泡的作用。机械消泡的优点是不需在发酵液中加 入其他物质，减少了由于加入消泡剂所引起的染菌机 会和对后续分离的影响。但是机械效果不如化学消泡 迅速、可靠、