转基因应用课程.pptxVIP

转基因应用课程;第2页/共80页;ATCG? 64个密码子，20种氨基酸？ 物质元素种类100+？ 118 or 11118;大胆质疑，谦卑求知;转基因动物技术及应用;;一、什么是转基因动物;第8页/共80页;二、转基因的导入方法;显微注射法;显微注射法;显微注射法基本流程;逆转录病毒感染胚胎法;???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ? ?;第15页/共80页;;胚胎干细胞法;胚胎干细胞法;精子载体法;精子载体法;细胞核移植法;细胞核移植法; 核移植也称克隆或无性繁殖，是将分离的胚胎卵裂球(核供体)或体细胞核与成熟并去核的卵母细胞或去核的原核期受精卵的去核胚胎(核受体)融合，不经过有性繁殖过程，连续不断地复制遗传上相同的胚胎，并通过克隆胚胎的移植生产大量同基因型的克隆动物系或动物群的一项动物繁殖新技术。;国产的克隆狗终于出现了，以后你会克隆一个自己死去的狗狗纪念他吗？;生殖细胞转染法;第26页/共80页;转基因动物的技术路线;?整合胚胎移植的技术路线 转基因动物 受体动物子宫  目的基因 非手术 胚胎移植? 体外受精 体外培养 多细胞胚胎 检测 整合外源基因卵子 受精卵 或囊胚 的胚胎精子 优点：受精卵的成活率高达90％以上，外源基因整合率高，提高受孕率。;核移植（克隆）的技术路线 目的基因 转基因动物? 导入?. 动物胎儿成纤维细胞 妊娠  取核?动物 去核 重组的 体外培养 囊胚期 胚胎移植 卵细胞 受精卵 胚胎 受体动物子宫;第30页/共80页;;小结; 从转基因的策略来看，动物转基因技术的发展经历了两个阶段：第一阶段为传统转基因动物阶段，第二阶段为条件性转基因动物阶段。 　　 借助转基因技术可将单一的功能基因和基因簇引入高等动物的基因组，或将目的基因从动物基因组中敲除，实现了种系内和种系间基因转移或修饰，产生新的基因型和表型。 　　 目前转基因动物主要应用在生物学基础研究、医学疾病模型、动物生物反应器、异种器官移植、动物遗传改良等５个方面。;基因敲除的小鼠模型的建立方法;培育基因靶向性敲除小鼠的实施步骤为： 1.首先将某基因突变位点经同源重组引入小鼠ES细胞。 2.将含有靶向敲除的突变基因位点的ES细胞注入小鼠早期胚胎中, 孕育出嵌合小鼠, 此嵌合小鼠体内胚系细胞群和体细胞群都会有来自ES细胞和受者胚胎鼠细胞的DNA。; 3.检测嵌合小鼠交配后的生殖细胞内是否整合有突变的基因位点。 4.在各只敲除的突变基因位点杂合性小鼠之间交配, 以产生纯合性基因敲除小鼠。 ;培养成功率低，技术难度大，尽管对研究遗传与疾病的相关性十分有用，但若敲除致命的功能基因，可使胚胎早期发生死亡。若所敲除基因可被其他功能基因代偿，则使表型改变模糊不明，有局限性。;基因转移后的存在方式及表达 (一)外源基因导入后的存在方式：外源基因被导入受体细胞后，在受体细胞内的存在方式有三种： 1. 非同源重组。大多数外源基因导入受体细胞后,与受体细胞染色体的某一位点随机整合，这样可带来正常基因的插入、缺失、易位等突变。 2. 同源重组。导入的外源DNA与受体细胞染色体的DNA 通过顺序取代或顺序插入实现同源重组。通过同源重组有可能导致受体细胞正常的基因发生突变，当然，也有可能代替原来的有遗传缺陷的遗传基因，从而纠正遗传缺陷。;3. 游离存在。外源基因没有整合到受体细胞中,而是以附