植物染色体显带技术.docxVIP

细胞遗传学实验 实验一植物染色体去壁、低渗、火焰干燥制片技术 一、 实验原理： 用此法可以显著提高染色体的分散程度和平衡性，可以减少染色体的变形、断裂等现 象，也可以减轻细胞质对染色体的覆盖。使染色体各组成部分一长臂、短臂、着丝粒、随 体、染色单体等都显示得比较清楚，有利于染色体测量和显带的分析。此法也很简单，首 先用酶解法去除植物细胞壁，再利用热胀冷缩的原理，将植物细胞在冰片上用火焰烧烤， 用力甩片能使细胞膜破裂，不需要特殊设备，同时也省去了繁杂的压片手续，显著提高了 制片的效率。 二、 实验目的： 学习植物染色体标本制备去臂、低渗法的技术，为染色体显带实验提供了优良的标本。 三、 实验步骤： 1材料的制备： 黑麦根尖（2n=14） 根尖材料的制备： 发根：将材料放入具有团粒结构条件的土壤中培养（锯木屑、土壤、砾石、麦杆、 谷草）；最适温度（23?32°C）；培养24h再放入0?4°C冰处理1~7天。目的:（1）使分裂速度 减慢，根尖长度整齐一致；（2）调节工作时间。再将材料从冰箱中取出又放回最适温度条件 下培养1~2天；待根尖长度为1.5?2cm即可处理。 2预处理：化学和物理两种 （1） 化学方法：（适合所有生物） 秋水仙素0.05?0.2% （白色粉末，易溶于水的巨毒药品）； 0.002M 8-羟基哇啉（淡黄色晶体，用少量的乙醇溶解再稀释，对禾本科植物的随体 很清楚）； C