实验七细胞器的分级分离.pptVIP

第一页，共十七页，2022年，8月28日 实 验 目 的 学习分离细胞器的一般原理及方法 第二页，共十七页，2022年，8月28日 实验原理 细胞内不同细胞器的比重和大小都不相同，在均匀密度介质中不同离心力下沉降的细胞器组成不同或在梯度介质中离心后分布于不同密度层，根据这一原理，差速离心法或密度梯度离心法就可将细胞内各种组分分离出来。 分离流程： 破碎组织（匀浆或研磨）－差速离心或密度梯度离心分离细胞器－结果检验分析 第三页，共十七页，2022年，8月28日 匀浆（Homogenization） 低温条件下，将组织放在匀浆器中，加入等渗匀浆介质(即0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化钙)进行破碎细胞使之成为各种细胞器及其包含物的匀浆。 第四页，共十七页，2022年，8月28日 各种匀浆、研磨器 第五页，共十七页，2022年，8月28日 差速离心分级分离(Fractionation) 由低速到高速离心逐渐沉降细胞器。 先用低速使较大的颗粒沉淀，再用较高的转速将上清液中的小颗粒沉淀下来。 Differential centrifugation High speed Low speed 第六页，共十七页，2022年，8月28日 密度梯度离心（density gradient centrifugation method ） 亦称平衡密度梯度离