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本发明提供了基于牛全基因组CRISPR‑Cas9敲除文库、敲除细胞库及筛选目标基因的方法,涉及文库构建技术领域。本发明提供了一种牛全基因组编码基因CRISPR‑Cas9文库的构建方法,并基于构建得到的牛全基因组CRISPR/Cas9敲除文库,首次构建了MDBK牛肾上皮细胞全基因组敲除细胞库。本发明基于牛全基因组CRISPR/Cas9敲除文库策略,首次筛选并鉴定了9个与β羟丁酸(BHBA)作用相关的候选基因,可作为药物筛选、标记辅助管理的分子标记或制备基因编辑抗病动物模型的分子靶点。
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 116356431 A
(43)申请公布日 2023.06.30
(21)申请号 202310322676.1 C12Q 1/6869 (2018.01)
(22)申请日 2023.03
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