Agilent1200高效液相色谱仪标准操作程序.docx

Agilent 1200 高效液相色谱仪标准操作程序 目的 使操作人员的操作步骤标准化。 适用范围 适用于仪器安装、调试、校准后正常状态下进展的操作。 责任者 质控科仪器分析员对此规程负责。 规程 清洗液、流淌相、封柱液预处理 全部清洗液、流淌相、封柱液在使用前均需过滤、脱气以及混合均匀。 甲醇-水〔10：90〕、乙腈-水〔10：90〕、超净水、乙腈均需存放在棕色溶剂瓶中。 含有乙腈的溶液以及不含乙腈但含有较高比例的其他有机溶剂的溶液在过滤时需使用有机相微孔滤膜，其它溶液在过滤时需使用水相微孔滤膜。 存放清洗液、流淌相、封柱液的溶剂瓶在每次装入溶液前需用少量过滤好的该溶液清洗数次。 接通电源,开启连机电脑,再接通仪器电源,仪器自检完毕，处于预备进展状态。双击桌面图标“仪器 1 联机”，翻开 Agilent 1200 化学工作站，在左上角下拉框中选择“方法与运行掌握”界面。显示如下 1 图标： 留意：肯定要先双击“仪器1 联机”图标，进入联机状态，方可双击“仪器 1 脱机”图标，同时进入脱机界面。否则，将无法联机。 泵 预备清洗液并装入溶剂瓶中，将吸滤器放入瓶内。安装所需用柱子。 将吹扫阀〔即“Purge”阀〕翻开，单击泵图标 ， 选择“设置泵”，将“流速”设置为 3.00ml/min。选择清洗液所在通道〔建议为A 通道〕，单击“确定”，在“系统视图”中单击“启动”运行泵，泵运行 10 分钟后，观看压力，应小于 10bar，假设大于此压力， 应更换purge 阀滤芯，调整流速 1.00ml/min。 关闭purge 阀，观看柱压是否正常。 2 选择“掌握”，在“用于泵密封垫清洗的泵”〔Seal Wash〕中选择“定期清洗”，“周期”设置为 5min，“持续”设置为 0.1min，同时观看试剂架中 10%异丙醇是否充分，相应的废液瓶是否有充分空间。 依据“柱使用记录中所规定的方法”清洗柱子约30 分钟后，在“掌握”组中的“泵”选项中选择“待机”，待系统压力降到 10bar 以下后，更换流淌相，在“掌握”组中的“泵”选项中选择“启动” 改用流淌相平衡柱子，约 30 分钟后柱子处于平衡状态。设定所需流速，在“停顿时间”中设定所需运行时间，在“后运行时间”设定所需后运行时间；选择“溶剂”项，设定各通道比例，单击“确定”。 4.2.6 如进展梯度分析，在“设置泵”组中选择“时间表”，单击“追加”，依据具体方法进展时间和相应的参数设置。 柱温箱 在系统视图中，单击柱温箱图标 ，并从菜单中选择“设置柱温箱”，设置“温度”选项，单击“确定”。 在试验开头时，用清洗液清洗柱子时，应同时开启柱温箱；在试验完毕时，用清洗液清洗柱子时，应关闭柱温箱，让柱子随着清洗过程渐渐冷却。要避开到封柱过程完毕后才关闭柱温箱，这会导致柱的寿命减短。 自动进样器 在系统视图中，单击自动进样器图标 ，从菜单“设置 3 进样器”，在“进样”组中，选择“洗针进样”，清洗瓶通常设为“91”；在最优化中设为“无”。 清洗瓶中的清洗剂通常为滤过的超净水，只需盖瓶盖，无需放置垫片。 可变波长检测器〔VWD〕 在系统视图中，单击检测器图标 ，并从菜单中选择“设置VWD 信号”，在“信号”组中设置波长，在“峰宽〔响应时间〕” 组中，单击下拉列表并选择“0.1min〔2s〕”，单击“确定”。 在“掌握”组中，选择关闭或翻开氘灯。一般状况下，待到系统走流淌相时即翻开氘灯预热；分析完毕时，用清洗液清洗柱子时， 即时关闭氘灯。 “自动进样器”、“柱温箱”、“检测器”中的时间表设置均与“泵” 全都。 上述“自动进样器”、“泵”、“柱温箱”、“检测器”的相关参数设置完毕后可在主界面选择“方法”，选择“方法另存为”保存方法，以后使用时可选择“调用方法”。 序列 在“方法和运行掌握”视图中，单击主工具栏上的“序列”面板，点击“仪器掌握”。 单击选择“序列参数”消灭如下对话框： ，切换至 4 “操作者姓名”一般填写姓名的首字母集合；“数据文件”选择“自动”；子名目填写“xxyyzz-aaa”，其中 xxyyzz 为 6 位数的年月日组合， aaa 为品名的首字母集合“；运行局部方法”选择“依据运行时选项表”； “等待时间”设置为0min；“未就绪超时”设置为0min；如该序列要走过夜，在“关闭”选择“序列运行后命令/宏”，假设所用的仪器为单元泵，选择“ LAMPALL OFF”,假设所用的仪器为四元泵，选择 “macro SHUTDOWN MAC,go” 单击“确定”。 单击“序列“面板，消灭如下对话框，设定序列表。 5 在“样品瓶“中输入样品瓶位置“1～99”；在样品样品名称中输入相应样品名称，具体参见附件一；在方法名称中输入相应的方法名称， 具体参见附件二；在“进样次数/瓶”输入所需