血清LDH同工酶测定.pptxVIP

血清LDH同工酶测定;关于同工酶;同工酶: 来源于同一个体或组织，能催化相同的化学反应，但其蛋白质分子结构、理化性质和免疫性能等方面都存在明显差异的一组酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶（LDH）同工酶。 ;为什么要进行血清 LDH同工酶测定？ ;南昌大学医学院; 文献：鲿科四种鱼LDH同工酶谱的研究 【摘要】：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对鲿科四种 鱼血清中LDH同工酶进行电泳分析,结果表明:四种鱼 血清LDH同工酶图谱的区带分布具有种的特异性;四 种鱼血清LDH同工酶A、B亚基比例关系反映的各品种 间亲缘的关系与形态学特征分析结果吻合,为鲿科四 种鱼分类提供进一步的理论依据. ; 是否人种间在差异呢？这个答案不 得而知，但有一点是明确的，那就是LDH同 工酶在人体不同器官和组织间是有差异的， 从医学角度来讲，利用这种特异性临床上对 LDH同工酶的检测可作为某些疾病诊断的依据 之一。;;;南昌大学医学院;;-; ;柱层析法 免疫化学法 热稳定性和抑制法 *电泳法： ;LDH 在电泳中的分离因素 ; 以乳酸钠为底物,LDH 催化乳酸脱氢生成丙酮酸,同时使氧化型辅酶INAD+还原为NADH,NADH又将氢传递给吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS),PMS再将氢传递给氯化硝基四氮唑蓝(NBT),使其还原为紫蓝色化合物,因此有LDH 活性的区带即着紫蓝色且颜色深浅与LDH活性成正比.; 缓冲液条：内含pH 8.4、离子强度0.075的巴比妥缓冲液 缓冲琼脂糖凝胶板：内含0.08mol/L， pH 8.3巴比妥-盐酸缓冲液EDTA-Na2溶液（10mmol/L），5g/L琼脂糖 底物显色液（临用前配制） 固定漂洗液 ; 打开仪器，选择电泳程序 点样、保湿，放电极架、挂缓冲条、放凝胶板 放点样梳、电泳，配显色液 加显色液 吸掉显色液、加固定液 吸掉固定液、放厚滤纸 烘干 胶片扫描 ;4、计算;5、注意事项;6、图谱分析-1;6、图谱分析-1;6、图谱分析-1;6、图谱分析-2;6、图谱分析-2;6、图谱分析-2;6、图谱分析-2;6、图谱分析-3;6、图谱分析-3;6、图谱分析-3;6、图谱分析-3;6、图谱分析-4;6、图谱分析-4;6、图谱分析-4;6、图谱分析-4;小结;1、LDH是由两种不同的亚基组成的四聚体，形成以下5种结构不同的同工酶 A.LD1（H4）/LD2（H3M1）/LD3（H2M2）/LD5（HM3）/LD4（M4） B.LD2（H4）/LD1（H3M1）/LD3（H2M2）/LD5（HM3）/LD4（M4） C.LD1（H4）/LD2（H3M1）/LD3（H2M2）/LD4（HM3）/LD5（M4） D.LD3（H4）/LD1（H3M1）/LD2（H2M2）/LD5（HM3）/LD4（M4） E.LD5（H4）/LD4（H3M1）/LD3（H2M2）/LD2（HM3）/LD1（M4）  ;2、LDH同工酶在我科使用的检测方法是 A.免疫化学法 B.琼脂糖凝胶电泳法 C.柱层析法 D.热稳定性和抑制法 ;3、LDH同工酶琼脂糖凝胶电泳显色是 A、酶的催化反应进行显色 B、丽春红S染色 C、氨基黑10B染色 D、与带负电荷染料溴甲酚绿结合显色 E、与带负电荷染料溴甲酚紫结合显色 ;4、LDH同工酶电泳参与显色反应易见光分解的是 A、吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS) B、乳酸钠 C、氯化硝基四氮唑蓝(NBT) D、辅酶INAD+ E、巴比妥缓冲液 ;5、下列哪个物质是LDH同工酶琼脂糖电泳酶促反应的底物 A、吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS) B、氯化硝基四氮唑蓝(NBT) C、辅酶I NAD+ D、巴比妥缓冲液 E、乳酸钠 ;6、LDH同功酶电泳图谱从正极到负极依次是 A、LD1、LD2、LD3、LD5、LD4 B、LD2、LD1、LD3、LD4、LD5 C、LD3、LD1、LD2、LD4、LD5 D、LD4、LD5、LD3、LD1、LD2 E、LD1、LD2、LD3、LD4、LD5  ;7、一男性患者35岁，胸痛9天，血液分析示白细胞19.1×109、中性粒细胞85%，LDH同功酶电泳图谱出现LD1＞LD2 反转变化，最有可能的诊断是 A、AMI B、溶血性贫血 C、巨细胞性贫血 D、恶性肿瘤 E、肌萎缩 ;8、一男性患者51岁，大三阳，ALT956u/l、AST859u/l，LDH同功酶电泳图谱常出现哪条带增高 A、LDH5 B、LDH1 C、LDH2 D、LDH3 E、LDH4 ;9、一患者52岁，血液分析示白细胞70×109/L，血片见大