综合性实验一 质粒DNA的小量制备和电泳鉴定.pptxVIP

综合性实验一 质粒DNA的小量制备和电泳鉴定;质粒 plasmid;;质粒的特性： 能独立自主进行复制。 细菌内的共生型遗传因子，能垂直遗传。 能赋予宿主细胞一些表型。;质粒的应用;大多数来自细菌的质粒是双链、共价闭合环状的分子，以超螺旋形式存在。;Visualization of topoisomers. In this experiment, all DNA molecules have the same number of base pairs but exhibit some range in the degree of supercoiling. Because supercoiled DNA molecules are more compact than relaxed molecules, they migrate more rapidly during gel electrophoresis.;琼脂糖凝胶电泳;;琼脂糖凝胶电泳分离核酸的基本技术;;二．实验原理;质粒提取原理;质粒DNA和基因组DNA的区别; 从大肠杆菌中分离质粒DNA方法众多，目前常用的有： ? 依据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成及结构等特点选择。 ? 碱变性法既经济且收得率较高,提取的质粒DNA可用于酶切,连接与转化。 ;碱裂解法提取质粒的原理;原理： 1. 强碱NaOH和