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非发酵菌及检验第1页/共54页第2页/共54页复习疑为伤寒沙门菌感染，应如何进行微生物学检验？Widal test 的定义和结果解释。根据生化反应和O抗原，可将志贺菌属怎样分群？请解释什么是“外斐试验”。第3页/共54页内容概述假单胞菌属（铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌）不动杆菌属（鲍曼不动杆菌）军团菌属第4页/共54页要求1.掌握非发酵革兰阴性菌（非发酵菌）的概念、特点及非发酵菌的初步辨认和初步分群方法；掌握铜绿假单胞菌的生物学特性及细菌学检验方法。2.熟悉嗜麦芽窄食单胞菌和不动杆菌属的生物学特性及细菌学检验方法。3.了解常见非发酵菌在医院感染中的意义，了解军团菌属的生物学特性及检验方法。 第5页/共54页定义：非发酵菌(nonfermenters) 革兰阴性杆菌， 指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用糖类的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌。 第6页/共54页主要特点：菌属菌种多，在分类学上分别属于不同的科、属和种 ；大多数不发酵糖类或仅以氧化形式利用糖类；大多数为专性需氧菌；主要存在于外界环境中，大多数为条件致病菌，是目前医院感染的主要病原菌。第7页/共54页常见菌属假单胞菌属(Pseudomonas)不动杆菌属(Acinetobacter)窄食单胞菌属(Stenotrophmonas)伯克菌属（Burkholderia）产碱杆菌属(Alcaligenes)无色杆菌属(Achromobacter)莫拉菌属(Moraxella)黄杆菌属(Flavobaterium)艾肯杆菌属(Eikenella) 土壤杆菌属(Agrobacterium)黄单胞菌属(Xanthomonas)丛毛单胞菌属(Comamonas)金氏杆菌属(Kingella)食酸菌属（Acidovorax）第8页/共54页鉴定系统非发酵菌生化鉴定系统第9页/共54页假单胞菌属 (Pseudomonas)　第10页/共54页一、分类 P335假单胞菌属包括200多个菌种，尤以铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）多见。恶臭假单胞菌生物变种(P.putica biovars)斯氏假单胞菌（P.stutizeri）曼多辛假单胞菌(P.mendocina)产碱假单胞菌(P.alcaligenes)假产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)第11页/共54页二、概述部分（自学）生物学特性致病物质和所致疾病微生物学检验药物敏感试验第12页/共54页三、铜绿假单胞菌 （一）细菌特性1. 形态染色革兰阴性杆菌，菌体细长，且长短不一，有时呈球杆状或丝状，单个、成对或短链状排列，无芽胞，有荚膜，菌体一端有单鞭毛。第13页/共54页2. 培养特性专性需氧，最适生长温度25~30℃，可在42℃生长，4℃不生长。营养要求不高，普通培养基上均能生长。产生多种色素，常见有绿脓素和荧光素。在液体培养基中呈表面菌膜生长，菌液上层为蓝绿色。第14页/共54页第15页/共54页第16页/共54页普通琼脂平板：菌落圆形、大小不一、边缘不整齐、扁平稍隆起、湿润光滑、常成融合状态。血琼脂平板：菌落大而扁平、有金属光泽、有生姜味，菌落周围有透明溶血环。麦康凯琼脂平板：菌落微小、无色透明，中心常呈绿色。第17页/共54页3. 生化反应氧化酶＋ O/F试验为氧化型（O）精氨酸双水解酶试验＋硝酸盐还原试验＋。第18页/共54页4.抗原构造 P338O抗原： 2种，成分分别是外膜蛋白（属特异性）和脂多糖（型特异性）。H抗原黏液抗原（S抗原）菌毛抗原第19页/共54页（二）临床意义 P3381. 致病因子 （1）侵袭力： 粘附素、荚膜多糖 （2）毒素： 外毒素、内毒素 （3）绿脓素 （4）侵袭性酶类：弹性蛋白酶、磷脂酶C第20页/共54页2. 所致疾病 医院感染的主要病原菌。烧伤创面感染、皮肤感染、肺部感染、泌尿道感染、中耳炎、脑膜炎、心内膜炎、败血症、急性角膜穿孔等。也可引起小儿类似沙门菌和霍乱样的严重腹泻。第21页/共54页多重耐药，能天然抗多种药物耐药机制：酶、菌体成分、外排泵、外膜渗透性改变、生物膜等第22页/共54页脑脊液、脓汁、痰液、尿液血液、环境用品粪便分离培养（SS、MAC）增菌培养直接涂片检查分离培养（BAP、MAC） 可疑菌落最后鉴定初步鉴定 形态染色特点 菌落特征 气味 绿脓素 氧化酶 + O/F：O生化试验分型试验（血清学、噬菌体）色素鉴定（三）微生物学检验第23页/共54页三、其它假单胞菌第24页/共54页第25页/共54页不动杆菌属(Acinetobacter) P341一、分类第26页/共54页归属奈瑟氏菌科。根据DNA-DNA杂交和营养特征分为32个基因种，但只有10个基因种16种不动杆菌有菌名，临床常见：基因种1：醋酸钙不动杆菌(A.calcoace