生物技术课件.pptxVIP

生物技术课件第1页/共23页 ContentsPCR的基本原理 1PCR反应五要素2PCR的步骤3PCR反应特点 4PCR技术研究新进展 5PCR仪器的发展 6在兽医分子生物技术中的应用7第2页/共23页 1.1 PCR的基本原理 聚合酶链反应或多聚酶链反应（Polymerase Chain Reaction, PCR），又称无细胞克隆技术(“free bacteria”cloning technique)，是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 第3页/共23页 1.2 PCR的基本原理变性退火 延伸PCR的基本步骤第4页/共23页 2、PCR反应五要素引物酶dNTP模板 缓冲液 即PCR反应的五要素第5页/共23页 3. PCR的步骤 1DNA变性（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下， 氢键断裂，形成单链DNA2退火（25℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。3延伸（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补的DNA链。 第6页/共23页 4、PCR反应特点PCR反应特点特异性强 对标本的纯度要求低 灵敏度高 简便、快速 第7页/共23页 4.