粉防己生物碱的提取分离和鉴别.docVIP

粉防己生物碱的提取分离和鉴别 粉防己为植物防己科粉防己Stephania tetrandrd S.Moore的根，又名汉防己，是祛风解热镇痛药物，其有效成分为生物碱，主要是汉防己甲素和汉防已乙素。汉防己生物碱具有降低血压及镇痛的作用，临床上除用作治疗高血压、心绞痛、神经性疼痛、抗阿米巴原虫外，还将粉防已生物碱的碘甲基、或溴甲基化合物作为肌肉松弛剂应用，此外汉防已甲素在动物实验中有抗癌、扩冠和解热抗炎的作用。 一、实验目的 1．掌握生物碱的提取原理和实验操作方法； 2．掌握生物碱的基本鉴别法； 3．掌握生物碱结构与一般性质的关系； 4．熟悉用柱层析分离纯化生物碱单体的方法。 二、仪器与试药 （一）仪器 RE-52旋转蒸发仪 SHB-循环水式多用真空泵 分液漏斗（250mL） HHS型电热恒温水浴锅 玻璃仪器气流烘干器 圆底烧瓶（1000mL） ZF-2型三用紫外仪 电热恒温干燥箱 移液管（10mL、5mL） 蒸发皿 小玻璃蒸发器 玻璃层析柱（2.0cmⅹ40cm） （二）试药 粉防己 乙醇 盐酸 氯仿 无水硫酸钠 滤纸 丙酮 中性三氧化二铝 无水硫酸钠 甲醇 浓氨水 硅胶G 凡士林 脱脂棉 漏斗 CMC-Na 改良碘化铋钾试液 汉防已甲素和汉防已乙素对照品 丙酮 苦味酸 碘化汞钾试液 雷氏铵盐试液 三、主要成分的结构和性质 汉防已根中总生物碱含量为1～3%，主要为汉防已甲素，含量约1～2%，汉防已乙素，含量约0.5%；轮环藤酚碱，含量为0.4%；以及其它数种微量生物碱。 表11－1 黄芩中主要成分的物理性质 中英名称 分子式 性状 熔点 旋光度 溶解性 汉防已甲素（Tetrandrine，汉防已碱，粉防已碱） C38H42O6N2 无色针状结晶（丙酮） 126～127℃ ＋297°（CHCl3，c =1.00，） 不溶于水和石油醚，易溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和氯仿等有机溶剂及稀酸水中，可溶于苯 汉防已乙素（Fangchinoline, 又称防已诺林碱，去甲粉防已碱） C37H40O6N2 在丙酮中结晶为六面体粒状，在甲醇中结晶为细棒状 134℃～136℃（丙酮），238℃～240℃（甲醇） ＋275°（CHCl3，c =0.57） 溶解度与汉防己甲素相似，因有一个酚羟基，故极性较汉防已甲素稍高，在苯中的溶解度小于汉防已甲素而在乙醇中又大于汉防已甲素，以此可以相互分离。具有隐性酚羟基，不溶于NaOH溶液 轮环藤酚碱（汉己素，Cyclanoline） C20H24O4N+ 氯化物为无色八面体状结晶，碘化物为无色丝状结晶，苦味酸盐为黄色结晶 214～216℃（氯化物）， 185℃（碘化物），154～156℃（苦味酸盐） 易溶于水、甲醇、乙醇和氯仿，难溶于苯、乙醚等非极性有机溶剂中 轮环藤酚碱 四、实验原理： 1．提取：利用游离的伯、仲、叔胺生物碱具有亲脂性，能溶于乙醇的性质，用乙醇提取总生物碱； 2．分离：利用水溶性生物碱（季铵类生物碱）易溶于水而难溶于有机溶剂的性质进行二者的分离； 3．粉防己甲、乙素的分离：利用甲、乙素在结构上的不同（二者极性大小不同）用氧化铝柱层析来分离甲、乙素。 五、生物碱的提取分离 1．总生物碱的提取、亲脂性与亲水性生物碱的分离 粉防己（150g）捣碎 放在1000mL圆底烧瓶中，用95%乙醇300mL水浴回流提取1小时，过滤 滤液 药渣 95%乙醇200mL同法提取0.5小时，过滤 滤液 药渣（弃去） 合并两次滤液，减压回收乙醇至约5～10mL 浓缩物 浓缩物 逐渐加入2%盐酸转移至蒸发皿中充分搅拌， 使生物碱溶解（不溶物呈树脂状析出）静置，过滤 残渣 酸滤液 留取5mL做生物碱反应，将滤液放在分液漏斗中先加入50mL氯仿， 再滴加浓氨水调pH至9-10，振摇萃取，静置分层后，分出氯仿层 氯仿液 碱水液 再用氯仿30mL萃取1次 氯仿液 碱水液 （轮环藤酚碱等） 合并氯仿液，蒸馏水洗涤2次，每次20mL，分出氯仿层 水层 氯仿层 放在干燥具塞三角瓶内加20g无水硫酸钠，密闭， 振摇数分钟，静置，用干燥滤纸过滤 滤渣 氯仿层