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- 2023-07-12 发布于江苏
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第五章 核酸类药物;第一节 概述; 98%分布于细胞核,其余分布于核外如线粒体,叶绿体。;;一、RNA的制备
(一)材料的选择与预处理
制备RNA的材料要选择含核酸量丰富的组织。
RNA的含量和细胞的活跃程度有关,在蛋白质合成旺盛的细胞中,其核酸的含量也相应地较高。;1. 酸处理法
将经酸和有机溶剂处理后的残留物用1mol/L的过氯酸液于4℃下处理18 h,从中抽提出RNA,沉淀部分再用0.5mol/L的过氯酸液70 ℃下处理20 min提取DNA。
此法的缺点是有些材料的DNA在冷过氯酸抽提时被少量提取,从而使RNA部分中混有少量的DNA。
2. 碱处理法
将残留物用1mol/L的NaOH溶液于37 ℃处理过夜,则RNA被碱解为碱溶性核苷酸,DNA不溶解。加入过氯酸或三氯乙酸使溶液酸化,至酸浓度为5%-10%,此时,RNA的分解产物溶解在上清液中,DNA等则被沉淀下来。此法的优点是RNA和DNA分开得较为彻底,缺点是RNA中还含有其他含磷化合物,如磷肽,磷酸肌醇等。;(二)提取与纯化;2. 纯化
(1)密度梯度离心法
(2)柱色谱法
(3)凝胶电泳法;(三)含量测定;二、DNA的制备;三、核苷酸、核苷及碱基的制备;光合磷酸化法制备ATP的工艺流程;ATP的药理作用与临床应用;第五章 酶类药物;第一节 概述 ;对酶类药物的要求;二、酶的分子组成及分类;2. 酶
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