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微生物检测基本技术 第一页,共二十一页,2022年,8月28日 染色观察 第二页,共二十一页,2022年,8月28日 革兰氏染色 1884年丹麦医师Gram所发明 第三页,共二十一页,2022年,8月28日 革兰氏染色法 1.涂片固定 2.单染—结晶紫染液第一次染色 1min 第四页,共二十一页,2022年,8月28日 3.媒染—碘-碘化钾溶液浸湿30S 4. 脱色—95%乙醇溶液进行颜色洗脱 5.复染—红色的藩红染液第二次染色 第五页,共二十一页,2022年,8月28日 呈现第二次染色的效果红色;称革兰氏阴性菌(红阴G -) 细菌呈现第一次染色的效果紫色,革兰氏阳性菌(紫阳G+); 第六页,共二十一页,2022年,8月28日 划线接种,分离纯化 Inoculating an agar plate to obtain single colonies 第七页,共二十一页,2022年,8月28日 第八页,共二十一页,2022年,8月28日 灼烧 第九页,共二十一页,2022年,8月28日 第十页,共二十一页,2022年,8月28日 第十一页,共二十一页,2022年,8月28日 生化反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。 微生物生化反应: 糖酵解试验 淀粉水解试验 V-P试验 甲基红(Methyl Red)试验 靛基质(Imdole)试验 枸椽酸盐试验: 尿素酶(Urease)试验 三糖铁(TSI)琼脂试验 第十二页,共二十一页,2022年,8月28日 糖酵解试验 不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。 第十三页,共二十一页,2022年,8月28日 淀粉水解试验 某些细菌可以产生分解淀粉的酶,把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后,遇碘不再变蓝色。 第十四页,共二十一页,2022年,8月28日 V-P试验 某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,称V-P(+)反应。 第十五页,共二十一页,2022年,8月28日
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