微生物检测基本程序.ppt

1.捣碎均质法 将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。 第三十页，共四十四页，2022年，8月28日 2.剪碎振摇法 将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。 第三十一页，共四十四页，2022年，8月28日 第一页，共四十四页，2022年，8月28日 本章的主要内容 食品微生物检验的一般步骤 检验前的准备 样品的采集 样品的送检 样品的处理方法 致病菌检验参考菌群的选择 样品的检验 检验结果的报告 第二页，共四十四页，2022年，8月28日 一.食品微生物检验的一般步骤 样品采集 样品处理 样品保存 选择参考菌群 检验前的准备 菌落总数 大肠菌群 致病菌 分离培养 分离培养 增菌 纯化 染色镜检 生化试验 血清学试验 动物试验 结果报告 第三页，共四十四页，2022年，8月28日 二.检验前的准备 准备好所需的各种仪器。 按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌，冷却后送无菌室备用。 准备好所用的各种试剂，做好普通营养琼脂或其他选择必培养基。 做好无菌室或超净工作台的灭菌工作，提前1h灭菌30~60min. 工作衣、鞋、帽、等灭菌后备用。 工作人员进入无菌室后，实验没有完成之前不得随便出入无菌室。 第四页，共四十四页，2022年，8月28日 三.样品的采集 第五页，共四十四页，2022年，8月28日 （一）采样的目的和意义 便于食品卫生质量监督管理 鉴别食品中是否存在有毒有害物质。 为新产品、新资源利用、新食品化工产品、新工艺投产前进行卫生鉴定。 第六页，共四十四页，2022年，8月28日 （二）样品的种类 大样，就是一整批； 中样，是从样品中各部分取得的混合样品，一般为200g； 小样，也称检样，做分析用的，一般为25g。 第七页，共四十四页，2022年，8月28日 （三）采样的步骤 采样前调查→现场观察→确定采样方案→采样 →样品封存 →开具采样证明 第八页，共四十四页，2022年，8月28日 （四）采样的要求 1、严格遵守样品采集的操作规程。 2、所采样品必须具有代表性。 3、采样操作要防止污染，防止变质、损坏、丢失。 4、不得加入防腐剂、固定剂等。 5、样品采集和现场测定必须有二人以上参加 。 第九页，共四十四页，2022年，8月28日 （五）食品微生物检验的采样方案 第十页，共四十四页，2022年，8月28日 1、食品卫生学微生物检验的取样方案 检验目的：检验食品的微生物卫生指标是否合格。 第十一页，共四十四页，2022年，8月28日 取样方案有： ICMSF取样方案； 美国FDA的取样方案； 世界粮农组织（FAO）取样方案； 我国的食品取样方案。 第十二页，共四十四页，2022年，8月28日 2、食物中毒微生物检验的取样 检验目的：查找食物中有何病原菌。 第十三页，共四十四页，2022年，8月28日 3、人畜共患病病原菌检验的取样 检验目的：鉴定畜禽及其产品是否带有人兽共患的病原菌。 第十四页，共四十四页，2022年，8月28日 （六）食品微生物检验采样方法 采样原则： 上能采取完整包装的样品就不拆开取样，必须拆开包装取样的应按无菌操作进行取样. 第十五页，共四十四页，2022年，8月28日 1、液体样品采样方法 充分混匀后，无菌操作打开包装，用100mL无菌注射器抽取,注入无菌盛样容器. 第十六页，共四十四页，2022年，8月28日 2、半固体样品采样方法 无菌操作打开包装，用无菌勺子从几个部位挖取样品，放入无菌容器。 第十七页，共四十四页，2022年，8月28日 3、固体样品采样方法 大块整体食品用无菌刀具和镊子从不同的部位割取，并注意其代表性； 小块大包装食品应从不同部位的小块上切取样品，放入无菌容器。 若为检验食品的污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质的情况，应从深部取样。 第十八页，共四十四页，2022年，8月28日 4、冷冻食品采样方法 大包装小块冷冻食品按小块个体采取； 大块冷冻食品可用无菌刀从不同部位削取或用无菌手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。 若为检验食品污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质情况，应从深部取样。 第十九页，共四十四页，2022年，8月28日 5、生产工序监测采样 车间用水：从车间各龙头采样； 车间台面、用具、及加工售货员手的卫生监测：用5cm2孔无菌采样板和5支无菌棉签擦拭25cm2面积，擦拭后立即用无菌剪刀将棉签头剪入无菌容器中。 第二十页，共四十四页，2022年，8月