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脱落细胞检查技术和
临床应用评价
1
第一节 标本采集和涂片制作方法
一、标本采集
(一)直视采集法
身体直视部位直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗、刷取等取细胞制片。
2
(二)自然分泌液的采集法
1.痰液涂片检查:
2.尿液涂片检查:
3.乳头溢涂片检查:
4.前列腺液涂片检查。
3
(三)灌洗洗
向空腔器官或腹腔、盆腔(剖腹探查时)灌注一定量生理盐水冲洗,使其细胞成分脱落于液体中,收集灌洗液离心制片,作细胞学检查。
4
(四)磨擦法
利用磨擦工具在病变部位磨擦,将擦取物直接涂片。常用磨擦工具有海棉磨擦器、线网套、气囊等。可分别用于鼻咽部、食管和胃部病灶的取材。
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(五)针穿抽吸法
当有胸腔、腹腔、心包腔及关节腔积液时,可用针穿抽吸部分积液作细胞学检查。此外某些深部组织器官,如淋巴结、甲状腺、软组织、肝等亦可作细针穿刺吸取部分细胞进行涂片诊断。
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二、涂片制作方法
(一)涂片前准备工作及涂片方法
1.涂片前准备工作
(1)取材后尽快制片。
(2)避免挤压以防止损伤细胞。
(3)涂片要均匀,厚薄要适度。
(4)玻片要清洁。
(5)涂片前先在玻片上涂薄层粘附剂, (6)至少涂两张玻片,以避免漏诊。
(7)及时玻片编号 。
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2.涂片制备方法
(1)推片法:用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。
(2)涂抹法:由玻片中心经顺时针方向外转圈涂抹;或从玻片一端开始平行涂抹。
(3)压拉涂片法:将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间,然后移动两张玻片,使之重叠,再边压边拉,获得两张涂片。
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(4)吸管推片法:
(5)喷射法:
(6)印片法:将切取的病变组织用手术切开,立即将切面平放在玻片上,轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。
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(二)涂片的固定
固定的目的
是保持细胞自然形态,防止细胞自溶和细菌所致的腐败。
固定原理
固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破坏细胞内溶酶体酶,使细胞保持自然形态,结构清晰,易于着色。
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1.固定液:
细胞学检查常用的固定液有下列三种:
(1)乙醚酒精固定液:该固定液渗透明性较强,固定效果好,适用于于一般细胞学常规染色。
(2)氯仿酒精固定液:又称卡诺氏固定液。其优点同上。
(3) 95%酒精固定液:适用于大规模防癌普查。制备简单。但渗透作用稍差。
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2.固定方法
(1)带湿固定:适用于巴氏或HE染色。痰液、阴道分泌物及食管拉网涂片等。
(2)干燥因定:适用于稀薄标本如尿液、胃冲洗液等。
3.固定时间:一般为15-30min。
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(三)涂片的染色
1.染色的目的:
是借助于一种或多种染料,使组织和细胞内结构分别着不同的染色。
2. 组织细胞染色原理:
染色的物理作用是利用毛细管现象,渗透、吸收和吸附作用,使染料的色素颗粒牢固地进入组织细胞,并使其显色。
染色的化学作用是渗入组织细胞的染料与其相应的物质起化学反应,产生有色的化合物。
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各染料都具有两种性质,即产生颜色;和与被染组织形成亲和力。这两种性质主要由发色基因和助色基因所产生的。
发色基团:苯的衍生物具有可见光区吸收带。其产生颜色的醌式环称为发色基团。
助色基团:是一种能使化合物发生电离作用的辅助原子团(酸碱性基团)。它能使染色的色泽进一步加深,并使其与被染色组织具有亲和力。
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2.常用染色方法:
(1)巴氏染色法:
本法染色特点是细胞具有多色性颜色,色彩鲜艳多彩。
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(2)苏木精—伊红(HE)染色法:
该方法染色透明度好,核与胞质对比鲜明。
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(3)瑞特—吉姆萨染色法;
胞质内颗粒与核染色质结构显示较清晰。
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第二节 显微镜检查
一、显微镜观察方法
1.检查涂片前必须严格核对涂片编号。
2.了解送检单上填写的全部资料。
3.阅片要全面、认真、细心, 由面到点观察。
4. 显微镜观察时必须按顺序视全张涂片,用推进器从左至右,自上而下移动。
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两种阅片顺序
错误 正确
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二、诊断报告方式
1.直接法:根据细胞学检查结果,直接写出关于疾病的诊断。
2.分级法:将涂片中细胞学检查发现的细胞变化,用分级方式表示。它的优点是能真实地反映细胞学所
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