中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)测定试剂盒(胶体金免疫层析法)说明书.docxVIP

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中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)测定试剂盒(胶体金免疫层析法)说明书 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)是一种由人体细胞产生的小分子蛋白,其分子量约为25 kDa。NGAL蛋白在正常情况下主要储存于肾上皮细胞的细胞质中,而在发生肾损伤时会释放到尿液中。因此,NGAL的测定可以作为肾损伤的一项重要指标。 本试剂盒采用胶体金免疫层析法进行NGAL的测定,是一种高灵敏度、高专一性、定量快速的方法。其操作简便、准确度高,可用于临床上对肾损伤和肾功能评估的研究。 试剂盒组成: 1. NGAL标准品:本试剂盒提供了NGAL的标准品,用于构建标准曲线。标准品浓度范围为X - Y ng/mL。 2. 过滤膜:用于筛选样本和将样本固定在试纸上。 3. 试纸条:用于进行NGAL的测定。试纸上有定量膜、白金标记线等重要组成部分。 4. 试纸夹:用于夹持试纸,方便操作。 5. 尤因斯液:用于稀释标准品和样本。 6. 收色剂:用于显色。 试剂盒操作步骤: 1. 准备 a) 取出所需试剂,并将其平衡至室温。 b) 打开试纸袋,并将试纸夹夹持试纸。 c) 使用过滤膜筛选样本,并将样本滴在试纸上的定量膜上。 2. 加样 a) 取出标准品和样本,使用尤因斯液进行稀释。 b) 分别将稀释后的标准品和样本滴在试纸上的定量膜上。每个孔滴2-3滴,避免气泡出现。 3. 试纸反应 a) 关上试纸盖,使试纸充分与样本反应。反应时间为X分钟。 b) 在试纸盖上的定量膜上固定白金线位置。 4. 显色 a) 滴加收色剂到试纸孔上,均匀覆盖试纸孔。 b) 收色时间为X分钟。 5. 测定 a) 使用试纸夹夹持试纸,放入试纸孔。 b) 将试纸插入读数仪器,并按照仪器说明进行测定。 c) 读取结果。 结果判读: 1. 通过标准曲线,读取样品的吸光值。 2. 根据吸光值,可计算出样品中NGAL的浓度。 注意事项: 1. 本试剂盒仅供科研使用,不可用于临床诊断。 2. 开封后,请及时使用,并保持试剂的保存条件。 3. 操作前,请确保所有试剂和设备已经达到室温。 4. 按照说明书的步骤进行操作,确保结果的准确性。 参考文献: 1. Mishra J, et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a biomarker for acute renal injury after cardiac surgery. Lancet, 2005, 365(9466): 1231-1238. 2. Bolignano D, et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a marker of kidney damage. Am J Kidney Dis, 2008, 52(3): 595-605. 3. Schmidt-Ott K M, Mori K, Li J Y, et al. Dual action of neutrophil gelatinase-associated lipocalin. Journal of the American Society of Nephrology: JASN, 2007, 18(2): 407-413. 4. Nickolas T L, Schmidt-Ott K M, et al. Diagnostic and prognostic stratification in the emergency department using urinary biomarkers of nephron damage: a multicenter prospective cohort study. Jama, 2012, 307(6): 661-671.

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