支原体培养检验操作程序.pdfVIP

支原体培养检验操作程序 一、接收标本：标本与检验单查对正确，标本质量合格。 二、标本处理：接种Uu、Mh培养药敏一体试剂盒：操作前将所需试剂取出 置室温30分钟。1、A排第一孔加入培养液100μL作为阴性对照；2、将标本拭 子直接放入培养液中充分振荡并在瓶壁挤干拭子，若为男性尿液取离心沉淀物 150μL或阳性标本取50μL于培养液中混匀。3、将混有标本的培养液各100μL 加入A排余下及B排各孔中；4、各孔加矿物油覆盖，置于37℃温箱培养。 第24、48小时分别观察记录结果。结果判断原理：培养基含有相应支原体 生长所需的蛋白质、马血清、生长因子、底物及酚红指示剂，当有支原体生长时， 底物被分解，使PH值升高，培养基由橙黄色变成红色，且清亮为阳性。培养基 不变色为阴性。B1孔阳性为解脲支原体阳性；B2孔阳性为人型支原体阳性。药 敏孔A排为高浓度，B排为低浓度，变红则耐药，不变红示敏感而不生长。当高 浓度与低浓度两孔均不生长(不变色)为该药敏感；高浓度不变色低浓度变红为该 药物中介；高浓度与低浓度均变红为该药物耐药。 结果一：第24 小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结 果判断；第24小时、48小时观察B2孔均不变色，示无人型支原体生长或浓度 极低，报告培养出解脲支原体，未培养出人型支原体。 结果二：第24 小时B1孔不变色示解脲支原体阴性；第48小时观察B2孔 由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断。报告未培养出解脲支原 体，培养出人型支原体附药敏结果。 结果三：第24 小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结 果判断；第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果 判断，报告培养出解脲支原体与人型支原体附药敏结果。 结果四：阳性对照孔由橙黄色变成红色示支原体阳性，药敏看结果判断；第 24小时、48小时观察B1孔、B2孔均不变色，示无解脲、人型支原体生长或浓 度极低，报告培养出非解脲、人型支原体或嘱病人重留标本复查。 结果五：第24、48小时观察B1孔、B2孔均不变色，示无支原体生长或浓 度极低，报告未培养出解脲及人型支原体。