血清球蛋白的分离纯化与鉴定详解演示文稿.pptVIP

血清球蛋白的分离纯化与鉴定详解演示文稿 当前第1页\共有22页\编于星期四\12点 （优选）血清球蛋白的分离纯化与鉴定 当前第2页\共有22页\编于星期四\12点 二、原理 （一）盐析 1.概念和原理 盐析是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。 蛋白质在纯水中溶解度较低，若稍加一些无机盐则溶解度增加，这种现象称为“盐溶”(salt in)。 而当盐浓度继续增加到某一浓度时，蛋白质又变得不溶而自动析出，这种现象称为“盐析” (salt out) 。 当前第3页\共有22页\编于星期四\12点 “盐析”破坏了蛋白质作为亲水胶体的两个稳定因素 但当盐浓度增加到一定浓度时，一方面大量的水同盐分子结合，使得蛋白质没有足够的水维持溶解状态，破坏了维持蛋白质亲水胶的水化膜 另一方面加入的盐离子中和了蛋白质分子相互排斥的电荷相互聚集沉淀出来 表面电荷 水化膜 当前第4页\共有22页\编于星期四\12点 2.常用中性盐： 盐析可用硫酸钠、氯化钠、磷酸钠和硫酸铵等中性盐，其中运用最广的是硫酸铵。 硫酸铵的优点 1. 在水中化学性质稳定， 2. 溶解度大， 3. 溶解度的温度系数变化较小， 4. 硫酸铵价廉易得，分离效果好， 5. 性质温和，高浓度时也不会影响蛋白质的生物学活性。 当前第5页\共有22页\编于星期四\12点 3.盐浓度计算