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第十三章 可见分光光度法和紫外分光光度法
【学习目标】
掌握 分光光度法的基本原理,Lambert —Beer 定律以及透光率、吸光度、摩
尔吸光系数等基本概念及相互关系。
熟悉 物质对光的选择性吸收,吸收光谱的意义;可见分光光度法的测定方
法—标准曲线法和标准对照法。
了解 光的基本性质,光的加和性;分光光度计的基本构造;比吸光系数比
较法、差示分光光度法和双波长法的测定方法;提高测量灵敏度和准确度的方法;
紫外分光光度法的一般概念。
【内容要点】
第一节 物质的吸收光谱
当光照射到某物质或某溶液时,只有光子的能量(h )与被照射物质粒子的基
态和激发态能量之差(E)相等时,才能被吸收。不同物质的基态和激发态的能量
差不同,选择吸收光子的能量也不同,即吸收的波长不同。光的能量与波长成反
比,波长越短,能量越高。
有色溶液的颜色是它所选择吸收光的补色,吸收越多 ,则补色的颜色越深 。
比较溶液颜色的深度,实质上是比较溶液对光的吸收程度。
任何一种溶液对不同波长的光的吸收程度是不同的。以波长为横坐标,吸
光度 A 为纵坐标作图 ,得到的曲线为吸收光谱。吸收光谱描述了物质对不同波
长的光的吸收能力 ,吸光度最大处的波长为最大吸收波长。不同的物质有不同的
吸收光谱,最大吸收波长也不同,它可以对物质进行初步 的定性分析 。吸收光谱
是分光光度分析中选择测定波长的重要依据 。通常选用最大吸收波长为测定波
长,具有最高的灵敏度。
第二节 分光光度法基本原理
一、透光率和吸光度
当一束平行单色光照射到溶液时,若不考虑光的反射,则入射光强度 I ,
0
吸收光强度 I ,透射光强度为 I 之间的关系为
a t
I ═ I + I (13.1 )
0 a t
透射光的强度 I 与入射光强度 I 之比称为透光率 T 表示
t 0
I
T = t (13.2 )
I
0
透光率的负对数称为吸光度,用符号 A 表示。
色是它所选择吸收光的色吸收越多则色的颜色越深比较溶液颜色的深度实质上是比较溶液对光的吸收程度任何一种溶
I
A = -lgT = lg 0 (13.3 )
I
t
二、Lambert —Beer 定律
Lambert 和 Beer 研究了吸光度 A 与液层厚度 b 和溶液浓度 c 之间的定量关系。
得出吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。这就是 Lambert —Beer 定律,
是光吸收的基本定律。
A ═ kbc
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