超敏反应性疾病的免疫学检验.ppt

第十四章 超敏反应性疾病的免疫学检验;返回总目录; 超敏反应（hypersensitivity）又称变态反应，是指机体再次接受相同抗原刺激后，发生的以组织细胞损伤或生理功能紊乱为主的特异性免疫应答。 ;第一节 激发试验; 非特异性激发：是用组胺等刺激物做雾化吸入， 以观察患者对Ⅰ型超敏反应的敏感性，进而分 析病因或判定疗效。 特异性激发：是用抗原如尘螨等做试验，对明确 超敏原有一定价值。 用于Ⅰ型和Ⅳ型超敏反应性疾病的检查。;一、皮肤试验;Ⅳ型超敏反应;皮内试验 点刺试验（挑刺或刺痕试验） 斑贴试验;（二）结果判定及分级标准;; 比皮内试验敏感性稍低，但假阳性较少； 皮试液浓度要比皮内试验高10～100倍。;速发型皮肤试验的结果判定标准;迟发型皮试结果判定标准;第一次读：48小时打开斑试器,间隔30min待斑试器 压痕消失后判定结果。 第二次读：第3天或第4天。 如怀疑光过敏，在斑贴试验的基础上给予紫外线照 射，操作过程相似。 ;斑贴试验结果判定标准;;;;;;阳性：机体已感染过结核杆菌或BCG接种成功； 强阳性：可能有活动性结核病； 阴性：机体未感染过结核分枝杆菌， 但应考虑： ①感染初期； ②老年人； ③重度结核病患者，机体处于免疫反应低下状态； ④患有其他疾病。;二、支气管激发试验;雾化抗原颗粒≤5微米; 特异性BPT 将一定浓度的抗原刺激物装入雾化器中 使受试者经口或鼻吸入雾化颗粒，其携带激发物在 支气管树及肺泡沉积而起作用。 非特异性BPT 将一定浓度的激发物装入雾化器中， 进行同特异性BPT的操作。 吸气流速、雾化颗粒直径的大小以及气道通畅与否 均可影响雾化颗粒在气道的沉积，从而影响气道的 反应性。;测基础肺功能 ;;;;;;;（四）应用与评价;观察症状;四、其他方法;第二节 IgE的检测 ; 临床意义 正常人群血清IgE水平受地域环境、种 族、遗传、年龄、性别、寄生虫感染、测定法及取 样等影响，结果有一定差异。 ;二、特异性IgE的测定; ;特异性变应原加入待检血清;第三节 免疫复合物检测;;一、抗原非特异性CIC检测技术;CIC的检测方法：按抗体分子在???合抗原后发生的 物理学和生物学特性的改变而设计。 ①PEG比浊法; ②ELISA法; ③胞法——Raji细胞法; ④抗球蛋白技术—mRF凝胶扩散试验。 ;（一）PEG比浊法; ①2%PEG沉淀大分子CIC； ②4%PEG沉淀较小分子CIC； ③超过5%PEG选择性沉淀CIC的特性消失； ④温度影响极大，需进行温差校正； ⑤低密度脂蛋白使浊度增加，空腹采血； ⑥高γ球蛋白血症和标本反复冻融浊度增加。;（二）ELISA法; ①灵敏度高于PEG比浊法，检测到0.1mg/L，重复性好等优点； ②C1q制品不易精制, 纯品不稳定，只能检出与补体结合的CIC。;（三）细胞法—Raji细胞法; 将定量待检血清、HAHG和Raji细胞混合，使补体、CIC或HAHG与Raji细胞形成复合物，加入抗人IgG·FIC，形成Raji细胞—补体—CIC(或 HAHG)—抗人IgG· FIC复合物，检测荧光强度。; ①培养条件能改变Raji细胞其表面受体的数量及亲和性，影响检测敏感性; ②待检血清中如有抗淋巴细胞的抗体，能和Raji细胞反应; ③SLE血清中的抗DNA也能和Raji细胞反应，使测定结果偏高。 ; ①敏感性高(6mg/L HAHG)，实用性强； ②缺点需培养Raji细胞和同位素标记抗人IgG，操作繁琐; ③Raii细胞培养较困难，不易长期稳定保持其特性，培养条件受限。;（四）抗球蛋白技术—mRF凝胶扩散试验;2.技术要点 将mRF和待检血清中的CIC在琼脂凝胶中扩散，mRF—CIC结合形成沉淀现象，进行CIC定性或定量。 3.方法评价 敏感度较低100mg/L（HAHG），mRF来源受限，操作费时，难于常规应用。;CIC检测方法的基本原理及敏感性比较;二、CIC检测方法评价及应用;①肾脏疾病：急性肾小球肾炎、移植肾、IgA肾病； ②消化系统疾病：慢活肝炎、原发性胆淤性肝硬化； ③皮肤病：荨麻疹、天疱疮、皮疹性皮炎； ④Ⅲ型超敏反应性疾病：SLE、RA、硬皮症、自身 免疫性溶血性贫血等。 此外，CIC的检测对于肿瘤、肝癌、白血病、霍奇金病、神经肌肉萎缩性侧索硬化症等疾病的诊断。; 固定或沉积于病变局部组织中的IC测定常用免疫组化技术，如荧光免疫组化技术检测到组织标本有Ig和补体。受累组织的成分、构型和特定的部位可为疾病的严重程度和预后提供依据。;类型;