第三章核酸扩增技术课件.pptVIP

EcoR I 5’-GAATTC-3’ 5’-NNNNNNNGAATTCNNNNNN-3’ 5’-NNNNNNNG AATTCNNNNNN-3’ P1 P2 当前第62页\共有93页\编于星期三\8点 5’-NNNNNNNGAATTCNNNNNN-3’ 5’-NNNNG AATTCNNN-3’ 5’-NNNNNNNGTATTCNNNNNN-3’ EcoR I 5’-NNNNNNNGTATTCNNNNNN-3’ EcoR I + _ + _ 当前第63页\共有93页\编于星期三\8点 RFLP的优缺点 RFLP用于检测点突变 可以确定点突变的位置 当前第64页\共有93页\编于星期三\8点 二、等位基因特异性寡核苷酸 Allele specific oligonucleotide, ASO是用寡核苷酸探针和PCR产物进行杂交以检测点突变的方法。 被检基因片段经PCR扩增并经电泳分离后转移到膜上，分别与经标记的含有正常序列和突变序列的寡核苷酸探针杂交。 PCR产物仅与完全互补的探针杂交 现在位置 P185 当前第65页\共有93页\编于星期三\8点 野生型基因DNA 突变型基因DNA 野生型基因DNA探针 突变型基因DNA探针 当前第66页\共有93页\编于星期三\8点 野生型基因DNA探针 突变型基因DNA探针 结论：不存在点突变 当