DB37_T 3118-2018禽蛋中氯霉素类药物残留量的测定　液相色谱法.pdf

ICS 67. 120. 20B45DB37山東东省地方标准DB 37/T 3118—2018禽蛋中氯霉素类药物残留量的测定液相色谱法Determination of multi-residues of chloramphenicols in eggs-Liquid chromatographic method2018-02-02发布2018-03-02实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T 3118—2018前言本标准遵照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准主要起草单位：济南市产品质量安全监测中心。本标准主要起草人：莫员峰、时再再、要波、周萌、田硕、王娟、高丛春、祁佳、张灵君、朱剑英、刘海江、吕盛凯。I DB37/T 3118—2018禽蛋中氯霉素类药物残留量的测定液相色谱法1范围本标准规定了禽蛋中氯霉素类药物残留量检测的高效液相色谱测定方法。本标准适用于鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、蚂蛋中氯毒素、甲矾毒素、氟苯尼考药物残留量的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件，GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样中的氯霉素类药物残留用乙酸乙酯提取，浓缩后用乙复溶，正已烷去脂，高效液相色谱-紫外法测定，外标法定量。t试剂或材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂。4.1水，GB/T 6682，一级。4.2乙酸乙酯。4.3乙睛：色谱纯。4.4正己烷。4.5流动相：乙睛溶液，乙睛（4.3）+水（4.1）=20+80。4.60.2mo1/L（pH=10.6）碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液：称取9.32g无水碳酸钠和1.01g碳酸氢钠，加水(4.1)溶解，转移至500mL容量瓶中，定容混匀。4. 7氯霉素、甲矾霉素、氟苯尼考对照品：含量≥99.0%。4.8氯莓素、甲砜霉素、氟苯尼考标准贮备液：精密称取氯霉素、甲鼠霉素、氯苯尼考对照品10mg，于10ml容量瓶中，用乙睛溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1mg/nlL的标准贮备液。-18℃保存，有效期为3个月。4.9氯莓素、甲矾霉素、氟苯尼考标准中间溶液：精密量取1g/mL氯莓素、甲霉素、氟苯尼考标准贮备液1.0mL，于100mL容量瓶中，用流动相稀释，配制成浓度为10μg/mL的氯霉素、甲矾霉素、氟苯尼考标准中间落液。2C8保存，有效期为1个月，4.10氯霉素、甲矾霉素、氟苯尼考混合标准工作液：分别准确移取10g/mL氯霉素、甲矾霉素、氟苯尼考标准贮备液适量，用流动相（4.5）稀释，配制成浓度为20.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L、200μg/L、500g/L的氯霉素、甲矾霉素、氟苯尼考混合标准工作液。现用现配。5仅器设备5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。1 DB37/T 3118—20185.2分析天平：质量0.00001g。5.3天平：质量0.01g5.4均质器。5.5涡旋囊荡混合器。5.6离心机：5000 r/min以上。5.7↓旋转蒸发仪。5.8氮气吹干仪。5. 9有机微孔滤膜：0.45期。6样品6.1样品的制备a)取均质后的供试样品，作为供试试料。b)取均质后的空白样品，作为空白试料。c取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准溶液，作为空白添加试料，6.2试料的保存-18℃以下保存，7试验步骤7.1提取平行做两份试验，称取（2.00±0.05）g禽蛋均质液，放于50mL具塞离心管中，准确加入20mL乙酸乙酯（4.2），1.00ml碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液（4.6），涡旋5min充分混匀，5000r/min以上离心5min。准确移取10mL上清液至鸡心瓶中，用旋转蒸发仪50℃C蒸发至干。残渣用1mL乙睛（4.3）复溶，同时加入5mL正已烷（4.4）去脂，涡旋混匀。分取乙睛层，正已烷层复加入1m1乙睛萃取，分取乙睛层，合并两次乙睛层于同一离心管中，于50℃氮吹至干，用1.00mL流动相（4.5）复溶残渣，过0.45期有机微孔滤膜，上机测定。7.2高效液相色谱测定7. 2. 1色谱条件a)色谱柱：Cis（250mm×4.6mm，粒径5m），或相当者.b) 检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器。c)流动相：乙晴+水=20+80。(p流速：1.0 mL/min (a检测波长：氯霉素270nm，日甲矾霉素、氟苯尼考225nm。f)柱温：25℃g)进样量：507. 2. 2定量测定取试样溶液和相应的混合标准工作液分别上机测定，以标准工作液作多点校准进行定量，以峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。标准溶液及试样溶液中氯毒素、甲矾霉