基于四环素调控系统的TRE-C-imp13转基因小鼠的构建及表达分析的开题报告.docxVIP

基于四环素调控系统的TRE-C-imp13转基因小鼠的构建及表达分析的开题报告 一、研究背景及意义 四环素调控系统（Tet-on/off system）是一种经典的基因表达调控技术，该技术可以实现对特定基因的高效、可逆性的调控。该系统主要由两个组分组成：Tet响应元（TRE）和特异性转录因子（例如Tet-Transactivator，tTA）。TRE序列可以启动与TetR蛋白直接相互作用，从而阻止特异性转录因子与响应基因间的结合。当四环素或者其衍生物（例如Doxycycline，Dox）存在时，与TetR的亲和性降低，TetR被释放出来，特异性转录因子即可结合响应元激活响应基因的表达。 随着遗传学、细胞生物学以及发育生物学的不断发展，利用Tet-on/off技术构建转基因小鼠已成为基因功能研究的常用手段。当前，常见的转基因小鼠设计都包含TRE序列作为响应元用于响应四环素或其衍生物的调控，然而，不同TRE序列的性能会存在一定的差异，并且很可能会受到组蛋白、DNA甲基化以及染色质结构等因素的影响。因此，本研究旨在构建基于四环素调控系统的TRE-C-imp13转基因小鼠，并对该响应元在小鼠内的表达特性进行分析。 二、研究内容和方案 （一）转基因小鼠的构建 TRE-C-imp13是响应元序列，本研究计划采用基因克隆技术构建响应元与绿色荧光蛋白（GFP）的融合基因。利用TRE序列进行诱导，该