DB37_T 3676-2019种猪场伪狂犬病净化技术规范.pdf

ICS65. 020. 30B 41DB37山瀘东省地方标准DB 37/T 3676—2019种猪场伪狂犬病净化技术规范Technical Regulation of Eradication of Pseudorabies in Swine BreedingFarms2019-08-30发布2019-09-30实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T 3676—2019目次前言1范围2规范性引用文件3术语和定义4检测方法4.1仪器4.2耗材.4.3试剂..4.4核酸检测.4.5血清学检测5净化群的建立5.1净化策略5.2感染状况普查阶段5.3强化免疫阶段5.4检测与海汰阶段5.5强制净化阶段5.6假定健康阶段.5.7净化场的评估阶段6净化场的维持阶段6.1免疫6.2监测6.3引种检疫6.4生产记录不佳的种猪检测7综合生物安全措施7.1合理的猪场选址7.2生产模式.7.3饲养管理7.4消毒措施.7.5无害化处理措施7.6有害生物防治措施7.7其它生物安全措施7.8档案管理-.附录A（资料性附录）猪伪狂犬病免疫无疫评估实验室检测方法及抽样要求附录B（资料性附录）猪伪狂犬病净化评估实验室检测方法及抽样要求 DB37/T 3676—2019附录B（资料性附录）猪伪狂犬病净化评估实验室检测方法及抽样要求表B.1猪伪狂犬病净化评估实验室检测方法及抽样要求检测项目检测方法抽样种群抽样数量样本类型生产公猪存栏50头以下，100%采样；生产公种公猪猪存栏50头以上，按照证明无疫公式计算（置信度95%，预期流行率3%）。特采样数量按照血清抗体检测gE-ELISA存栏比例分配到不同栋舍后随机抽样。生产母猪按照证明无疫公式计算采样数量（置信度95%，后备种猪预期流行率3%）：随机抽样，覆盖不同猪群。血清8 DB37/T言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省动物疫病预防与控制中心、山东省畜牧总站、山东汇众兽医科技服务公司。本标准主要起草人：季云闵、张栋、张月、周开锋、楚遵峰、注洋、王士荣、王叛、曹振山、刘波，1I DB37/T 3676—2019种猪场伪狂犬病净化技术规范1范围本标准规定了种猪场猪伪狂犬病净化的检测方法、净化群的建立、净化场的维持及综合生物安全措施.本标准适用于种猪场猪伪狂犬病净化。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 17823集约化猪场防疫基本要求GB/T 17824. 2规模猪场生产技术规程GB/T 18641伪狂犬病诊断技术116 J./89伪狂犬病病毒荧光PCR检测方法NY/T 1168备离龚便无害化处理技术规范NY/T 1568标准化规模养猪场建设规范DB37/T 2384种猪场消毒技术规范《病死及病害动物无害化处理技术规范》农医发（2017）25号《跨省调运乳用种用动物产地检疫规程》农牧发（2019）2号3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1伪狂犬病Pseudorabies病。3. 2净化eradication对种猪场采取一系列措施，达到消灭和清除猪伪狂犬病的过程。在某一限定的种猪场内，根据猪伪狂犬病的监测结果，及时发现并海汰感染猪只，使种猪群中猪伪狂犬病逐渐被清除的疫病控制方法，3. 3猪伪狂犬gE基因缺失疫苗Pseudorabies gEgenedeleted vaccine利用猪伪狂犬E基因缺失病毒株所制成的疫苗。 DB37/T 3676—20194检测方法4. 1仪器4. 1.1荧光PCR检测仪。4. 1. 2PCR仪和凝胶成像系统（根据实验室条件选择，替换4.1.1）。4. 1. 3高速台式冷冻离心机：可控温至4C、离心速度可达12000r/min以上。4. 1. 4组织研磨器或者研体。4. 1. 5普通冰箱。4. 1. 6微量移液器：0.2μL~2μL，1μL10L~~1 000 μL.4. 1. 7酶标仪。4.1. 8恒温箱。4. 1. 9高压灭菌锅。4.2耗材4. 2. 11.5 mL离心管4. 2. 20.2mLPCR薄壁管。4. 2. 3酶标板，移液器吸头。4. 3试剂4. 3.1除非另有说明，在检测中使用的试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682的要求。4. 3. 2商品化DNA抽提试剂，于4C保存。4. 3. 3无水乙醇，-20℃预冷。75%乙醇，无水乙醇和双蒸水配制，-20℃C预冷。4. 3. 5含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10mmo1/L，-20C保存，避免反复冻融。4. 3