NYT 4357-2023 植物源性食品中叶绿素的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ＩＣＳ 65.020.01 备案号：XXXX-XXXXCCS B 04 备案号：XXXX-XXXX 中华人民共和国农业行业标准 ＮＹ ／ Ｔ 4357—2023 植物源性食品中叶绿素的测定高效液相色谱法 Determination of chlorophyll in foods of plant origin by high performance liquid chromatography 2023 － 04 － 11 发布 2023 － 08 － 01 实施 中华人民共和国农业农村部 发 布 NY/T ４３５７—２０２３ 前 言 本文件按照 GB/T１１—２０２０?标准化工作导则 第１ 部分:标准化文件的结构和起草规则?的规定起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部农产品质量安全监管司提出. 本文件由农业农村部农产品营养标准专家委员会归口. 本文件起草单位:北京市营养源研究所有限公司、农业农村部食物与营养发展研究所、内蒙古蒙牛乳 业(集团)股份有限公司、大连工业大学、北京工商大学、北京林业大学、北京市理化分析测试中心、北京市 农林科学院农产品加工与食品营养研究所、北京东方倍力营养科技有限公司、安徽国泰众信检测技术有限 公司、中国农业科学院农产品加工研究所. 本文件主要起草人:崔亚娟、朱大洲、孔凡华、张淏惟、赵祯、白沙沙、刘玉峰、许洪高、特日格乐、林立 民、王佳、马利军、杜明、李赫、孟冬、杨清、贾丽、刘光敏、蒋峰、蒋彤、何涛、刘璇. Ⅰ NY/T ４３５７—２０２３ 植物源性食品中叶绿素的测定 高效液相色谱法 １ 范 围 本文件规定了植物源性食品中叶绿素的高效液相色谱测定方法. 本文件适用于植物源性食品中叶绿素的测定. ２ 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款. 其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件. GB/T６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法 ３ 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. ４ 原 理 试样中的叶绿素经甲醇提取、浓缩后,经反相液相色谱柱分离,用紫外检测器或二极管阵列检测器检 测;根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量. ５ 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T６６８２规定的一级水. ５１ 试剂 ５１１ 无水硫酸钠(Na２SO４). ５１２ ２,６Ｇ二叔丁基对甲酚(C１５H２４O):简称BHT. ５１３ 甲醇(CH３OH). ５１４ 甲醇(CH３OH):色谱纯. ５２ 试剂配制 ０１％ BHT 甲醇溶液:称取０１gBHT(５１２)于烧杯中,用甲醇(５１３)溶解后,转移到１００ mL 容量瓶中,用甲醇(５１３)定容,混匀. ５３ 标准品 ５３１ 叶绿素a(C５５H７２MgN４O５,CAS号:４７９Ｇ６１Ｇ８),纯度≥９５０％,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质. ５３２ 叶绿素b(C５５H７０MgN４O６,CAS号:５１９Ｇ６２Ｇ０),纯度≥９５０％,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质. ５４ 标准溶液配制 ５４１ 标准储备溶液(１００μg/mL):称取叶绿素a标准品、叶绿素b标准品各５００mg(精确至００１mg)分别置于烧杯中,用甲醇(５１４)溶解后,分别转移到５０ mL 棕色容量瓶中,用甲醇(５１４)定容.标准储备溶液置于棕色样品瓶中,充氮密闭,－１８ ℃冰箱储存,有效期３个月. ５４２ 混合标准工作溶液:分别移取叶绿素a标准储备溶液和叶绿素b标准储备溶液(５４１)０１０ mL、 ０２０mL、０５０mL、１００mL、２００mL、５００mL,混合于１０mL 棕色容量瓶中,用甲醇(５１４)定容,得到浓度为１００μg/mL、２００μg/mL、５００μg/mL、１０００μg/mL、２０００μg/mL、５０００μg/mL 的系列混合 １ NY/T ４３５７—２０２３ 标准工作溶液,现用现配. ５５ 材料 ５５１ 有机系微孔滤膜:孔径为０４５μm. ５５２ 反向液相色谱柱:C１８柱,５μm,１５０ mm×４６ mm(内径),或等效柱. ６ 仪器与设备 ６１ 天平:感量００００１g和０００００１g. ６２ 高效液相色谱仪:配有二极管阵列检测器或性能相当的检测器. ６３ 匀浆机. ６４ 高速粉碎机. ６５ 冷却水循环装置. ６６ 涡旋振荡器. ６７ 数控超声波清洗器. ６８ 高速离心机,转速≥６０００r/min. ６９ 旋转蒸发仪. ６１０ 氮吹仪. ７ 分析步骤 ７