醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白.pptVIP

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  • 2023-08-01 发布于广东
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(优选)醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 当前第1页\共有28页\编于星期三\15点 血清中含有清蛋白,α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和各种脂蛋白等。各种蛋白质由于氨基酸组分、立体构象、分子量、等电点及形状不同,在电场中迁移速度不同。分子量小、等电点低、在相同碱性PH值缓冲体系中,带负荷电荷多的蛋白质颗粒在电场中迁移速度快。 例如,以醋酸纤维素薄膜为支持物,正常人血清在PH8.6的缓冲体系中电泳1h左右,染色后可显示5条区带。清蛋白泳动最快,其余依次为α1-、α2-、β-及γ-球蛋白(如图3-5)。 当前第2页\共有28页\编于星期三\15点 图3-5正常人血清醋酸纤维素薄膜电泳示意图 1为清蛋白,2,3,4,5分别α1-,α2-,β-及 γ-球蛋白,6为点样原点 当前第3页\共有28页\编于星期三\15点 这些区带经洗脱后可用分光光度法定量,也可直接进行光吸收扫描自动绘出区带吸收峰及相对百分比。 此法由于操作简单,快速,分辨率高及重复性好等优点。它不仅可用于分离血清蛋白,还可用于分离脂蛋白、血红蛋白及同工酶的分离测定。 当前第4页\共有28页\编于星期三\15点 【实验材料】 1.电泳仪 包括直流电源整流器和电泳槽两个部分。 2.醋酸纤维素薄膜。 当前第5页\共有28页\编于星期三\15点 ⑵ 试剂 4 试剂 ①

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