农学毕业论文7篇：辣椒疫病生防菌的筛选、鉴定及其抑菌机理初探 .docVIP

农学毕业　7篇 内容提要： ? 辣椒疫病生防菌的筛选、鉴定及其抑菌机理初探 ? 有些植物为什么会发光 ? 棉田磁化水灌溉脱抑盐作用及促生效果示范 ? 襄阳市测土配方施肥的现状与展望 ? 钼蓝比色法测定笃斯越橘成熟果实中还原型抗坏血酸含量及体系优化 ? 农业产后　的分析与探讨 ? 高产早熟耐密抗倒伏宜机收玉米新品种‘京农科728’的选育与配套技术研究 全文共32772 字 辣椒疫病生防菌的筛选、鉴定及其抑菌机理初探 【摘 要】采用平板稀释法和平板对峙试验，从武汉、荆州、宜昌和荆门等地的辣椒根际土壤中分离到１８５株细菌，筛选到１株具有高效拮抗辣椒疫霉菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｃａｐｓｉｃｉ）的生防菌Ｂｓ０４。通过形态学观察、生理生化指标测定、１６Ｓ ｒＤＮＡ序列测定及进化树构建，确定菌株Ｂｓ０４为枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）。Ｂｓ０４对辣椒疫霉菌丝生长抑制率达８０％，同时对烟草黑胫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ ｖａｒ． ｎｉｃｏｔｉａｎａ）、棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）、棉花枯萎病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ f.sb． ｖｅｓｉｎｆｅｃｔｕｍ）和黄瓜立枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ）具有明显的抑制作用。利用光学显微镜观察Ｂｓ０４对辣椒疫霉菌丝形态的影响，发现菌丝分支增多、顶端畸形、原生质浓缩及生长缓慢等现象，表明Ｂｓ０４具有显著的抑菌作用。 关键词：辣椒疫霉菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｃａｐｓｉｃｉ）；生防菌；鉴定；抑菌机理 辣椒疫病由辣椒疫霉菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｃａｐｓｉｃｉ）引起，是重要的辣椒根茎病害之一，在中国及世界其他　辣椒生产区发生严重，给辣椒生产造成巨大的经济损失。对于辣椒疫病的防治大多采用化学防治，而大量使用化学药剂导致了环境的严重污染，对消费者的身体健康产生了不利影响。目前，由于辣椒抗疫病品种较少，且多为中抗或不耐病品种，难以有效地控制辣椒疫病。因此，寻找　有效的防治措施成为控制辣椒疫病的一个亟待解决的问题。 植物病害的生物防治是利用有益生物和生物代谢产物对植物病害进行有效防治的技术与方法，具有无毒、无害、无污染和高效等优点，受到了研究者的青睐。　辣椒疫病的生物防治国内外均有相关研究报道［１－４］，但主要集中在生防菌的防效和应用上，对其控病机理研究却较少。在此基础上，针对湖北省辣椒疫病发生严重的状况，本研究从辣椒根际土壤中分离生防菌株，并对其进行鉴定，初步探讨生防菌的抑菌机理，为有效地防治辣椒疫病奠定基础。 １ 材料与方法 １．１ 供试菌株和培养基 辣椒疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｃａｐｓｉｃｉ）、烟草黑胫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ ｖａｒ． ｎｉｃｏｔｉａｎａ）、棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）、棉花枯萎病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ f.sb． ｖｅｓｉｎｆｅｃｔｕｍ）、黄瓜立枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ）均由长江大学生命科学院实验室保存。培养基为牛肉膏蛋白胨培养基（ＮＡ）、马铃薯葡萄糖培养基（ＰＤＡ）。 １．２ 土样采集和处理 从武汉、荆州、宜昌和荆门等辣椒种植区疫病发生严重的田地，利用五点采样法从生长健康辣椒根际采集土样。采样时铲去表层５ ｃｍ土层，取新鲜土样５００ ｇ，用保鲜袋保存。称取土样１０ ｇ加入装有９０ ｍＬ无菌水的三角瓶中（内装玻璃珠若干），３０ ℃、１２０ ｒ／ｍｉｎ振荡３０ ｍｉｎ，静置后获得土壤悬液。 １．３ 生防细菌的筛选 将土壤悬液稀释成１０－５、１０－６、１０－７浓度，吸取不同稀释度的土壤悬液１００ μＬ涂布于ＮＡ培养基上，置于２８ ℃培养４８ ｈ，挑取颜色、形态等不同的细菌单菌落并纯化、保存。采用平板对峙法测定分离到的细菌对辣椒疫霉的抑菌活性。将辣椒疫霉菌在ＰＤＡ平板上活化，用打孔器在菌落边缘打取菌块（直径６ ｍｍ），接种到ＰＤＡ平板　。培养１ ｄ后，在距离辣椒疫霉菌块２ ｃｍ处的４个对接点接种待测细菌，２８ ℃培养，５ ｄ后观察抑菌结果，每个处理设３次重复。 １．４ 拮抗菌株的鉴定 将筛选到的抑菌效果较好的菌株进行菌落形态观察、显微形态观察、革兰氏染色、芽孢染色、水解淀粉试验、甲基红试验（Ｍ．Ｒ）、Ｖ．Ｐ试验、柠檬酸盐试验、接触酶反应试验、明胶液化试验、运动性试验等主要形态和生理生化指标鉴定［５，６］。参照文献［７］方法提取疑似枯草芽孢杆菌基因组ＤＮＡ。根据已报道的枯草芽孢杆菌１６Ｓ ｒＤＮＡ的保守区序列设计引物ＢｓＦ（５′－ＴＧＣＡＣＡＣＡＣＣＧＣＣＣＧＴ－３′）和ＢｓＲ（５′－ＧＧＧＴＴＧＣＣＣＣＡＴＴＣＧ－３′），以枯草芽孢杆菌疑似株基因组为模板，进行ＰＣＲ