DB37_T 4051-2020中兽药散剂中添加喹乙醇、乙酰甲喹的测定　超高效液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 11. 220B 41DB37山 長东省地電方标准DB37/T4051—2020中兽药散剂中添加喹乙醇、乙酰甲喹的测定超高效液相色谱-串联质谱法Determination addition of olaquindox and mequindox in traditional chineseveterinary drughigh performance liqud chromatography- tandem massspectrometry202007-09 发布2020-0809实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T 4051—2020目次前言11范围2规范性引用文件3原理，4试剂或材料5仪器设备6测定步骤6. 1提取6. 2标准曲线的制备6. 3仪器参考条件6. 4测定7数据处理检测方法的精密度附录A（资料性附录）喹乙醇、乙酰甲唑特征离子质量色谱图 DB37/T 4051—2020前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省兽药质量检验所。本标准主要起草人：章安源、牛华星、张传津、李有志、陈玲、刘宵飞、陆庆泉、陈志强、魏秀丽张志民、杨修镇。II DB37/T 4051—2020中兽药散剂中添加喹乙醇、乙酰甲喹的测定超高效液相色谱-串联质谱法1范围本标准规定了中兽药散剂中唑乙醇、乙酰甲喹的超高液相色谱-串联质谱测定方法，本标准适用于中兽药散剂中喹乙醇、乙酰甲唑的测定。本方法唑乙醇、乙酰甲唑检出限均为50mg/kg，定量限均为100mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法，3原理中兽药散剂中的唑乙醇、乙酰甲唑用乙睛落液提取，经超高效液相色谱仪分离后，串联质谱检测，保留时间和离子丰度比对照定性，外标法定量。4试剂或材料除非另有规定，所用试剂均为色谱纯。4.1水：符合GB/T6682一级水的规定。4.2乙睛（CHCN）：色谱纯。4.3甲酸（HCOOH）：色谱纯。4.4甲醇（CH;OH）：色谱纯。4.5流动相（0.1%甲酸水溶液）：量取甲酸（4.3）1mL，溶于水，移入1000mL容量瓶中，稀释至刻度，过0.22μm微孔滤膜备用。4.6初始流动相（5%乙腈溶液）：量取乙睛（4.2）10mL与水（4.1)190mL，混勾后备用。4.760%乙溶液：量取乙睛（4.2）60mL与0.1%甲酸水溶液（4.5）40ml，混匀后备用。4.8标准物质：唑乙醇，纯度99.5%，乙酰甲唑，纯度≥99.6%。4.9标准储备液：准确称取唑乙醇、乙酰甲唑标准物质（4.8）各10g（准确至0.00001g），加甲醇落液分别转移置10mL棕色容量瓶中，加甲醇（4.4）落解并稀释至刻度，摇匀，得标准物质储备液4.1010μg/mL的混合标准溶液：准确吸取唑乙醇、乙酰甲唑标准储备液（4.9）各1.0mL，置100mL棕色容量瓶中，加甲醇（4.4）溶解并稀释至刻度，摇匀。得10g/mL的混合标准溶液。现配现用。4.11离心管。4.12有机微孔滤膜：0.22μm。1 DB37/T 4051—20205仪器设备5. 1超高效液相色谱串联质谱仪：电喷雾离子源（ESI十）。5. 2分析天平：感量0.00001g感量0.0001g，感量0.01g5. 3超声波清洗器。6测定步骤6. 1提取准确称取待测样品0.2g（精确到0.001g）于250mL三角烧瓶中，加入50mL60%乙睛溶液(4. 7)超声提取15min，转移置100mL容量瓶中，加流动相（4.5）稀释至刻度。用滤纸过滤，收集续滤液，准确吸取续滤液1.0mL，置10mL容量瓶中，用流动相（4.5）稀释至刻度，摇匀，滤膜过滤，过滤液待测。同时按上述步骤做样品空白试验。6. 2标准曲线的制备准确吸取10g/mL的标准溶液（4.10）5.0ml，置100mL容量瓶中，用空白试样溶液稀释至刻度摇勾，得500ng/mL的标准溶液，分别吸取500ng/mL的标准溶液适量，用空白试样溶液倍比稀释，得5ng/nl、10ng/mL、25ng/ml、50ng/mL、100ng/mL、125ng/nL、250ng/mL的标准物质系列工作液。6. 3仪器参考条件6. 3. 1高效液相色谱参考条件色谱柱：Cl100m×2.1m，粒径1.7μm，或性能相当者。流动相A：乙。流动相B：0.1%甲酸水溶液流速：0.4 mL/min进样量：5μL。柱温：35℃.液相色谱梯度洗脱条件见表1。表1液相色谱梯度洗脱条件时间ABmi