YC_T 407-2011烟用添加剂中水杨酸的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 65. 160YCX 85备案号：33252-2011中华人民共和国烟草行业标准YC/T 407—2011烟用添加剂中水杨酸的测定高效液相色谱法Determination of salicylic acid in tobacco additives-High performance liquid chromatographic method2011-08-02 发布2011-09-01实施国家烟草专卖局发布 YC/T 407—2011前本标准按照GB/T 1.1一2009给出的规则起草请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会烟用材料分技术委员会（SAC/TC144/SC8)归口。本标准起草单位：云南烟草科学研究院、红塔烟草(集团)有限责任公司、红云红河烟草(集团)有限责任公司。本标准主要起草人：缪明明、陈永宽、张承明、者为、王璐、孟昭宇、苏钟璧、王明锋、李劲竹、杨光宇、李中昌。 YC/T 407—2011烟用添加剂中水杨酸的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了烟用添加剂（香精和料液)中水杨酸的测定方法一高效液相色谱法。本标准适用于烟用添加剂(香精和料液)中水杨酸的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法YC/T145.10—2003烟用香精抽样3原理采用含0.1%甲酸的甲醇-水混合溶剂萃取烟用添加剂中的水杨酸，经高效液相色谱仪分离，以荧光检测器测定，外标法定量。4试剂与材料除特殊要求外，均使用分析纯试剂。4.1水,符合 GB/T 6682中一级水的要求。4.2乙,CH;CN,色谱纯。4.3 甲酸,HCOOH。4.4 甲醇,CH;OH。4.5 水杨酸,C,H,O3(CAS:69-72-7),纯度97%。4.6甲醇-水混合溶剂,体积比 9：1。4.7 萃取溶剂:取 1 mL甲酸(4.3)置于 1 000 mL容量瓶中,用甲醇-水混合溶剂(4.6)定容至刻度。4.8标准溶液4.8.1一级标准储备液称取 100 mg(精确至0.1 mg)水杨酸(4.5)，用萃取溶剂(4.7)溶解并移人 100 mL容量瓶中,定容至刻度并摇匀。在 4 ℃下保存,有效期1个月。4.8.2二级标准储备液准确移取 2.5 mL一级标准储备液(4.8.1)至 50 mL 容量瓶中，用萃取溶剂(4.7)稀释定容至刻度并摇匀。在 4℃条件下保存,有效期1个月。4.8.3标准工作溶液分别准确移取 100 μL、500 μL、1000 μL、2 000 μL、4 000 μL、6 000 μL 二级标准储备液(4.8.2)至50 mL容量瓶中，用萃取溶剂（4.7)定容到刻度,得到系列标准工作溶液。即配即用。1 YC/T 407--20115仪器设备常用实验仪器及下述各项：5.1高效液相色谱仪，配置柱温箱、梯度洗脱功能和荧光检测器。5.2分析天平,感量0.1 mg。5.3振荡器，最大转速应不小于200r/min。5.4离心机,最大转速应不小于 8 000 r/min。5.5有机相滤膜,0.45 μm。6抽样按照YC/T145.10—2003的规定抽取样品。7分析步骤7.1样品处理称取 2g(精确到 0.1 mg)试样于 100 mL具塞锥形瓶中，准确加人 50 mL 萃取溶剂（4.7)，用150r/min 振荡萃取10 min。取3mL萃取液置于10 mL具塞离心试管中，在5000 r/min转速条件下离心10 min,取1mL上清液过有机相滤膜(5.5）,滤液用高效液相色谱仪分析。若待测试样溶液的浓度超出标准工作曲线浓度范围，则对样品前处理适当调整后重新测定。7.2高效液相色谱条件以下分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性。-Ci:色谱柱，规格：填料粒径3.5μm，250mm（长度）×4.6mm（内径）；流动相A：0.1%的甲酸乙腈溶液（体积分数）；流动相B:0.1%的甲酸水溶液(体积分数）;柱温：35℃；一流速:1.0 mL/min;进样量：10 μL;-梯度洗脱程序见表1;-荧光检测器检测波长：入ex（激发波长)为290 nm，^em（发射波长）为400 nm。表 1 梯度洗脱程序流动相 A流动相 Bmin%%0.0020805.0031692 YC/T 407—2011表1 (续)时间流动相 A流动相 Bmin%22. 009010 32.00208043.0020807.3标准工作曲线制作按照色谱条件(7.2)测定标准