NY_T 4039-2021CN禽偏肺病毒感染诊断技术.pdf

ICS 11.220CCS B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 4039—2021禽偏肺病毒感染诊断技术Diagnostic techniques for avian metapnumevirus infection2021-12-15发布2022-06-01实施中华人民共和国农业农村部发布 NY/T 4039—2021目次前言引言范围规范性引用文件3术语和定义4缩略语临床诊断5.1临床症状5. 2结果判定实验室诊断6. 1样品采集6. 2样品运输6. 3样品存放6. 4病毒分离6. 5RT-PCR检测6.6抗体ELISA检测7综合判定附录A(资料性)病毒分离用溶液配制附录B(资料性)aMPV 感染 Vero CPE附录C(资料性)琼脂糖凝胶配制附录D(资料性)检测aMPV通用型N基因引物扩增序列(228bp） NY/T 4039—2021附录B（资料性）aMPV感染Vero CPE正常Vero见图B1。接种感染aMPV样品的Vero(图B2)，培养6d~8d，通常盲传3代~5代.会出现细胞收缩变围、细胞膜融合形成多个细胞核的合胞体，图B.1正常Vero图B.2感染aMPV样晶的Vero NY/T 4039—2021附录C(资料性）琼脂糖凝胶配制C.150×TAE缓冲液的配制(pH8.0)Tris242 gNa, EDTA · 2H; O37, 2 g将上述试剂按次序溶于900mL去离子水中，充分溶解，加入57.1mL醋酸，充分搅拌，加去离子水将溶液定容至1L，室温保存。C. 22%琼脂糖凝胶的配制琼脂糖2 g1XTAE缓冲液100 mL取50×TAE缓冲减2mL，加人98mL去离子水，配成100mL1×TAE缓冲液，加人三角烧瓶中，再加人琼脂糖，加热充分溶解。当温度降低至50C左右，加人3gL~5μLEB或EB替代物，混匀后倒人制胶模具内，插入齿梳，等待凝胶凝固。8 NY/T 4039—2021附录D（资料性）检测aMPV通用型N基因引物扩增序列(228bp)ATGCAAGCTTATGGAGCTGGGCAGACTATGCTAAGATGGGGTGTTGTGGCGAGATCATCCAATAACATCATGTTGGGCCATGTGTCTGTGCAGGCAGAGCTAAGGCAGGTCTCAGAAGTGTACGATCTTGTTAGGAAAATGGGTCCTGAATCAGGCCTCCTCCACTTAAGGCAAAGTCCAAAAGCAGGCTTACTATCATTAACAAGTTGCCCCAACTTTGCAAGTGTT NY/华人民共和国农业行业标准禽偏肺病毒感染诊断技术NY/T 4039—2021中国农业出版社出版（北京市朝阳区麦子店街18号楼）（邮政编码；100125网址 ; www, ccsp, com- cn)北京科印技术咨询服务有限公司印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销***开本 880mmX1230mm1/16印张 1字数20千字2022年4月第1版2022年4月北京第1次印8$号， 16109 · 8937定价；34.00元版权专有侵权必究NY/T4039-2021举报电话：（010 NY/T 4039—2021前 言本文件按照GB/T1.1—2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草，请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任，本文件由农业农村部畜牧兽医局提出。本文件由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。本文件起草单位；中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、北京市农林科学院畜牧鲁医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、青岛嘉智生物技术有限公司。本文件主要起草人高玉龙、王笑梅、刘爵、刘华雷、秦立廷、刘长军、王楷成、王菁、祁小乐、潘青、韦莉、蒋文明、王素春、李凯、高立、张艳萍、崔红玉。- NY/T言禽偏肺病毒(Avianmetapneumovrus，aMPV)引起的疾病最早在火鸡上发现，其广泛存在于多种家禽，火鸡是其主要的宿主，其次是鸡、鸭等。aMPV感染火鸡引起火鸡鼻气管炎（Turkeyrhinotracheitis，TRT)）；感染鸡引起肿头综合征（Swollenheadsyndrome，SHS)，主要引发呼吸道症状和产蛋量下降，根据aMPV吸附蛋白(G蛋白)基因的不同，将其分为A、B、C和D4个亚型。其中,A、B亚型在世界各地均有广泛报道，欧洲主要流行A、B两种亚型的病毒，以B亚型为优势流行毒株；面C亚型aMPV主要在美国、法国和韩国被报道；D亚型aMPV仅在法国被报道。感染鸡的主要以A型和B型aMPV为主，目前，许多国家都有该病报道，我国也有报道。血清学检测