SN_T 4876.5-2017DNA条形码方法 第5部分：曼陀罗属.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4876.5--2017DNA条形码方法第5部分：曼陀罗属Method for DNA barcode--Part 5 :Datura L.2017-11-07 发布2018-06-01 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局涂 SN/T 4876.5--2017前言SN/T4876《DNA条形码方法》共分为5个部分：-第1部分：检疫性乳白蚁；-第2部分：检疫性断眼天牛；第3部分：检疫性卷蛾；第4部分：检疫性高梁属；第5部分：曼陀罗属。本部分为SN/T4876的第5部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国黄埔出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国检验检疫科学院、中华人民共和国广东出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检疫局。本部分主要起草人：印丽萍、傅怡宁、左然玲、伏建国、邵秀玲、徐瑛、范晓红、吴海荣、于文涛。 SN/T 4876.5-—2017DNA条形码方法第5部分：曼陀罗属1范围SN/T4876的本部分规定了曼陀罗属植物的DNA条形码检测方法。本部分适用于曼陀罗属植物的DNA条形码的测定、结果比对分析与判定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T 4343曼陀罗属检疫鉴定方法SN/T 4468粗刺曼陀罗检疫鉴定方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1DNA 条形码DNA barcode生物体内能够代表该物种的，标准的、有足够变异的、易扩增且相对较短的DNA片段。研究人员可用DNA条形码技术鉴定物种及物种间亲缘关系，修改已有的分类学结论等。3.2凭证标本voucher specimen一种为鉴定或研究提供实物依据并具有足够存档信息（采集及鉴定信息等)而长期保存的标本，它可以是完整的生物个体或其一部分，也可以是生物体的遗传物质。模式标本也属凭证标本。凭证标本记录的存档信息应具有追溯性。凭证标本的保存非常重要，需要有详细的标本编号、存放地点等详细信息，以便于日后查证。3.3内转录间隔区 the internal transcribed spacer;ITS核糖体 RNA(rRNA)基因非转录区的一部分，位于核仁区。用于鉴定的 ITS序列通常包括 ITS1、5.8S 和 ITS2。4曼陀罗属植物基本信息中文名:曼陀罗属学名:Datura L.分类地位（恩格勒系统，1964年）：被子植物门Angiospermae双子叶植物纲Dicotyledoneae合瓣花亚纲 Sympetalae 管花目 Tubiflorae茄亚目 Solanineae茄科 Solanaceae分布情况：据报道，该属在全球分布有9种～13种，此外还有些具有争议性的多年生木本植物种在很多报道中都被分开归类到新的属，即：木曼陀罗属 Brugmansia Pers.;这些植物种自然分布于中南美1 SN/T 4876.5—2017洲、亚洲和北非。另据，《中国植物志》记载，中国分布有四种，即：毛曼陀罗D.inoxia Miller，洋金花D,metelL.，曼陀罗 D.stramonium L.和木本曼陀罗 D.arborea L.，并特别指出中国没有粗刺曼陀罗D.feror L.的分布；而据 Flora of China 记载，中国仅有三种分布，即：毛曼陀罗 D.inoria Miller，洋金花 D.metel L.，曼陀罗 D.stramonium L.，而木本曼陀罗 D.arborea L.归属于新的木曼陀罗属 Brugmansia Pers..传播途径：随交通运输工具、农具等传播到新的地区，也可通过混杂于谷物、种子和其他产品中远距离传播。5　方法原理根据曼陀罗属的ITS序列特征，应用DNA条形码技术对曼陀罗属及部分种进行检测。6仪器设备和主要试剂6.1仪器设备PCR仪、电子天平（1/10 000g）、冷冻混合研磨仪、电泳仪、凝胶成像系统、高速冷冻离心机、解部镜、PH计、涡旋振荡器、冰箱。6.2用具可调式微量移液器（2μL、10 μL、20μL、100 μL、200μL、1000μL)及相应的吸头、离心管、PCR管、EP管、3.0 mm 灭菌钢珠等。6.3主要试剂植物基因组提取试剂盒、超纯水、DNA Marker、琼脂糖、核酸凝胶染料、液氮、脱氧