NY_T 3197-2018热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程 橡胶树炭疽病.pdf

ICS 65.020B 16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3197-2018热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树炭疽病Technical code of practice for resistance identification to diseases and insects oftropical crops germpalsm-Anthracnose of rubber tree2018-03-15发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T3197—2018前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由农业部农垦局提出。本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所。本标准主要起草人：黄贵修、刘先宝、李博勋、蔡吉苗、李超萍、陈奕鹏、时涛、杨扬。I NY/T3197—2018热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树炭疽病1范围本标准规定了橡胶树种质抗炭疽病评价的术语和定义、接种体制备、田间接种鉴定、田间自然条件下抗病性评价、鉴定有效性判定、重复鉴定和抗病性终评。本标准适用于橡胶树种质抗炭疽病品系筛选。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T221橡胶树栽培技术规程NY/T2263橡胶树栽培学术语3术语和定义NY/T2263界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3. 1橡胶树炭疽病anthracnoseof rubbertree由胶孢炭疽菌（Colletotrichumgloeosporioidescomplex)）或尖孢炭疽菌(C.acutatumcomplex）侵染引起的真菌病害，可造成橡胶树的枝梢回枯、反复落叶和落果。橡胶树炭疽病田间症状、病原参见附录A。4接种体制备4.1病原物分离与保存用常规组织分离法，从橡胶树炭疽病的叶部病斑上分离病原菌，对分离物进行纯化和致病性测定，分离物经形态和分子鉴定，确认为胶孢炭疽菌或尖孢炭疽菌后，筛选强致病力菌株，低温保存备用。4.2接种体制备将保存的供试菌接种到马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA)平板上，（28土1）℃，自然光照下培养48h，用灭菌的棉签将菌落充分打断成菌丝小片段，加人3mL灭菌水混匀菌丝片段，取200μL均匀地涂布到新配制的PDA培养基平板上，（28士1)℃，24h光照培养。当肉眼可见新生菌丝长出培养基表面时，再用灭菌的棉签轻轻将菌丝打断，并用灭菌水冲洗干净，晾干，盖上4层纱布，（28士1）℃，光照培养24h～48h。当培养基表面产生大量的炭疽菌分生孢子时，用灭菌水洗下孢子，调节孢子浓度为106个孢子/mL，加人0.02%（体积分数）的吐温20，备用。5田间接种鉴定5.1鉴定对照品系设“化59-2”为感病对照品系，“热研8-79”为抗病对照品系。5.2鉴定圃设计鉴定圃选址于橡胶树炭疽病常发区，地势平坦，土壤理化性质均一，四周无高大乔木，立地环境一致，每个种质种植20株，完全随机排列，种植规格75cmX75cm，鉴定圃管理按NY/T221的规定进行草、浇水及施肥，确保苗木生长旺盛。1 NY/T3197-20185.3接种苗木准备每年2月，将种植一年多的供试橡胶树苗，在接穗上方约40cm处锯于，待橡胶树整齐抽出大量古铜色叶片时，进行接种试验5.4接种时间接种时间为当年的3月。5.5接种方法用喷雾器向橡胶树叶片喷施孢子悬浮液直至叶片挂满水滴为止，每份种质接种5株，重复3次，以喷施灭菌水做对照，塑料袋套袋保湿24h5.6病情调查5.6.1调查时间接种后第7d进行调查。5.6.2调查方法调查对象为接种的古铜期叶片，每株随机调查4片复叶，共12片小叶。每个种质共调查180片小叶。5.6.3病情分级病情级别及相对应的分级标准见表1。表1橡胶树炭疽病病情分级标准病级分级标准0叶片上无病斑10病斑面积占叶片面积1/1621/16≤病斑面积占叶片面积1/831/8≤病斑面积占叶片面积1/441/4≤病斑面积占叶片面积1/2S病斑面积占叶片面积≥1/2，或叶片严重皱缩，或落叶5.6.4病情指数计算调查记载每个品系叶片的病情，并按式（1)计算病情指数。Z(R; × T,)DI =(1)SX5式中：DI-病情指数;R;一病级代表值；T 各级病叶数；S 调查的总叶片数。5.7抗病性评价5.7.1抗病性评价标准依据鉴定材料3次重复的病情指数（DI)的平均值确定其抗病性水平，划分标准见表2。表2橡胶树对炭疽病抗病性评价标准病情指数(DI)抗病性等级DI5高抗（HR)抗病(R)5DI≤2020DI≤30中感(MS)30DI≤40感病(S)DI40高感(HS)2 N