SC 7201.1-2006鱼类细菌病检疫技术规程 第1部分：通用技术.pdf

ICS 65.020.30B 41SC中华人民共和国水产行业标准SC/T 7201. 1--2006鱼类细菌病检疫技术规程第1部分：通用技术Rules for quarantining bacterial diseases of fishPart 1 : General technique2006-12-06发布2007-02-01实施中华人民共和国农业部发布 SC/T 7201.1—2006前 言SC/T7201《鱼类细菌病检疫技术规程》分为五个部分：第1部分：通用技术；第2部分：柱状嗜纤维菌烂鳃病诊断方法；第3部分：嗜水气单胞菌及豚鼠气单胞菌肠炎病诊断方法；第4部分：荧光假单胞菌赤皮病诊断方法；第5部分：白皮假单胞菌白皮病诊断方法。本部分为SC/T7201的第1部分。本部分的附录A和附录B为规范性附录。本部分由中华人民共和国农业部渔业局提出。本部分由全国水产标准化技术委员会归口。本部分起草单位：中国水产科学研究院长江水产研究所、中国水产科学研究院珠江水产研究所。本部分主要起草人：何力、邹为民、徐忠法、姜兰、周瑞琼、罗晓松。3 SC/T 7201.1—20063.1.20鞭毛染色剂。3.1.21微量或常量糖发酵试剂管(葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、七叶苷、水杨苷）。常用试剂与染色液的配制见附录A。细菌生化鉴定管可代替相应的生化试验培养基和试剂。3.2培养基3.2.1普通营养琼脂培养基按GB/T4789.28—1994中的4.7执行。3.2.2Rimler-Shotts 培养基按GB/T18652-2002附录A中的A.3执行。3.2.3胰陈琼脂(Cytophaga Agar)培养基见附录B中的B.1。3.2.4鉴别用培养基见附录B中的B.2~B.12。4器械设备4.1常用仪器4.1.1超净工作台。4.1.2显微镜（10倍×100倍）。4.1.3双筒解剖镜。4.1.4离心机(RCF 10 000×g～30 000×g)。4.1.5恒温培养箱。4.1.6高压灭菌锅。4.1.7冰箱。4.1.8普通天平（相对精度1/1000,分度值0.1g～0.01g)。4.1.94生化培养箱。4.1.10电位pH计。4.1.11烘箱。4.1.12恒温水浴锅。4.1.13匀质器或乳钵。4.1.144全自动细菌鉴定仪。4.1.15细菌生化鉴定管。4.2常用用具4.2.1骨剪。4.2.2直头解剖剪刀。4.2.3眼科手术小剪刀。4.2.4(直头、弯头)小镊子。4.2.5直头粗镊子。4.2.6解剖刀。4.2.7接种针(环)。4.3常用器血4.3.1白瓷解剖盘(桶、脸盆)。6 SC/T 7201.1—20064.3.2培养血。4.3.3试管。4.3.4酒精灯。4.3.5三角烧瓶：500mL、250mL。4.3.6载（盖)玻片。4.3.7广口瓶：500mL。4.3.8玻璃量筒4.3.9铅皮标本箱。5采样方法按SC/T7014—2006第4章的规定执行。6临床诊断6.1活动情况观察病鱼鱼体的摄食情况、行为特点等。6.2外部检查观察病鱼鱼体的体色。将病鱼放在白色的塘瓷盘中，记录下病鱼的种类、年龄、全长、体长、体高和体重。检查鱼体体表的各部位（包括眼睛、鼻孔、吻、鳍条、口腔、鳃丝等），观察其充血、溃烂、发炎、黏液情况；皮肤粗糙、溃烂情况；鳞片、鳍条、腹部肿大、肛门肿胀情况；病鱼是否畸形等。6.3制片镜检用弯头镊子(或解剖刀)刮取病变或异常部位黏液（或取其一部分组织)放在预先已滴有洁净水滴的载玻片上，盖上盖玻片，镜检。6.4解剖检查将鱼的体壁剪去一面，观察是否有腹水；消化道内食物情况，肠内壁黏液、充血、发炎情况：按病症分别检查肝、脾、肾、心等器官。7实验室诊断7.1取样将检验个体以活体或用无菌操作采下病变组织，迅速放入密闭的无菌容器，低温运送到实验室。体表病灶明显的个体，用刀片刮去表面腐烂部分后，用接种环（针）在病灶处无菌取材进行病原菌分离；无明显体表病灶的个体，应无菌取心血、肝、脾、肾等器官，无菌条件下操作，将样品捣碎，加无菌生理盐水或无菌水，匀浆后进行病原菌分离。7.2病原体分离与鉴定7.2.1培养基除特殊要求外，一般选用普通营养琼脂培养基。7.2.2分离方法按7.1的规定用无菌接种环在病灶处取样，在培养基平板上划线。可采用各种不同的常规划线方法，需尽量使其产生单个分散的菌落。在28℃～30℃培养24h。7.2.3纯培养用无菌接种环挑取单个菌落，接种到普通营养琼脂培养基斜面试管上，在28℃～30℃培养24h。7.3鉴定方法7 SC/T 7201.1—20067.3.1生化鉴定法根据细菌在代谢过程中所产生的合成或分解产物的不同，应用生物化学方法检测细菌的代谢产物，从而鉴定细菌的种、属的技术。多采用细菌生化鉴定管进行试验，也可利用全自动细菌鉴定仪鉴定。7.3.2免疫学检测法