RB_T 004-2019转基因检测方法验证指南.pdf

ICS 03.120.20A 00RB中华人民共和国认证认可行业标准RB/T 004—2019转基因检测方法验证指南Guidance on verification of analytical methods for genetically modifiedorganism testing2019-07-01实施2019-06-26 发布中国国家认证认可监督管理委员会发布 RB/T 004—2019次目前言引言1范围2术语和定义3缩略语4转基因检测方法验证附录A（资料性附录）DNA提取效果的评价方法附录B（资料性附录）DNA提取浓度对实际LOD的影响附录C（资料性附录）中间浓度阳性对照的制备10基于实时荧光 PCR 的转基因含量平均值、标准偏差和相对可重复性附录D（资料性附录）11标准偏差的评估参考文献15 RB/T 004—2019前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国北京海关、沈阳检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：饶红、韩玥、郭铮蕾、徐娜、李伟、付海滨。I RB/T 004—2019引言本标准的技术内容参考了欧盟联合研究中心(JointResearchCenter，JRC)编写的JRCEUR24790EN《经实验室间确认的转基因检测方法的验证》（Verification of analytical methods for GMO testingwhen implementing interlaboratory validated methods).二 RB/T 004—2019转基因检测方法验证指南1范围本标准给出了转基因检测基因扩增方法的验证与结果评价的指南。本标准适用于转基因检测实验室对转基因检测基因扩增标准方法进行验证。注：本标准不涉及对方法特异性和稳健性验证的内容。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1验证verification提供客观证据，证明给定项目满足规定要求。LISO/1EC17025：2017，定义3.8注：验证一个实验室能够充分按照标准要求进行操作。需要实验室提供客观证据，证明对于所用的样品基质，能满足检测方法规定的性能指标。通常，（标准）关键要求是真实度（一般用偏差形式表示）和精确度（一般为重复性和再现性），反映在测量不确定度中。客观证据是从实验室实际数据中得到的真实度和精确度。2.2确认validation对规定要求满足预期用途的验证。［[ISO/IEC17025:2017，定义3.9]2.3定量检测低限 limit of quantificationLOQ是指被检测的样品在合适的精确度水平上能被检测出的最低含量或浓度，并且依据ISO5725条款[2]或[3]，经过合作实验的满意证明或单一实验室的确认。[GB/T19495.1—2004，定义3.1.6］2.4检测低限limit of detectionLOD是指被检测物能够被可靠检出的最低浓度或含量。但是不必进行定量，并且已经经过合作实验的证明或单一实验室的确认。[GB/T19495.1-2004，定义3.1.5]2.5真实度trueness大量实验结果的平均值和认可参考值的一致性注：真实度（可信度）的量度标准通常是以斜率来表示的。可信度也就是所提到的“平均值的正确度”LGB/T19495.1--2004，定义3.1.81 RB/T 004—20192.6精确度precision在规定条件下所获得的独立测试结果之间的一致性。[GB/T19495.1—2004，定义3.1.9]3缩略语下列缩略语适用于本文件。CRM有证标准物质(Certifiedreferencematerial)C.值达到设定阅值的PCR循环次数（numberof PCRcyclesto pass a setthreshold)DNA脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid)GMO转基因生物(genetically modified organism)绝对检测低限（Absolute Limit of detection)LODabsLODrel *相对检测低限（RelativeLimitof detection）LOQabs绝对定量检测低限(Absolute limit of quantification)LOQrel 相对定量检测低限（Relativelimitofquantification）PCR聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）R²R²判定系数(R²coefficient of correlation)RSD可重复性标准偏差（Repeatabilitystandarddeviation）RSDr相对可重复性标准偏差（Pr