NY_T 3059-2016大豆抗孢囊线虫鉴定技术规程.pdf

ICS 65.020B 16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3059—2016大豆抗孢囊线虫鉴定技术规程Specification for identification of soybean resistance to cyst nematode2016-12-23发布2017-04-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T3059—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由农业部种子管理局提出并归口。本标准起草单位：吉林省农业科学院本标准主要起草人：张金花、任金平、高月波、王义生、李启云、刘晓梅、张伟、王继春、姜兆远。I NY/T3059—2016大豆抗孢囊线虫鉴定技术规程1范围本标准规定了大豆抗孢囊线虫的鉴定方法和评价标准。本标准适用于大豆种质资源和品种对大豆孢囊线虫的抗性鉴定和评价，2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1大豆孢囊线虫soybeancystnematode种土传、内寄生且能引起大豆叶部黄化和植株矮化症状的线虫，具体形态特征参见附录A。2. 2生理小种race大豆孢囊线虫种内在形态上没有差别.但在大豆不同品种上具有显著致病性差异的群体，需要采用一套鉴别寄主进行区分。2. 3鉴别寄主differential hosts用于鉴别和区分大豆孢囊线虫不同生理小种的一套带有不同抗性的大豆品种。3试剂、材料和仪器设备3.1基质蛭石，20日细沙。3.2标准筛网标准筛网一套，用于线虫孢囊、卵的过滤。3.3其他用品培养皿、托盘、镊子、烧杯、三角瓶、漏斗、软胶棒、剪刀、滤纸、酒精灯、研钵、量筒、花盆等3.4显微镜放大倍率：4倍～100倍，用于大豆孢囊线虫的形态鉴定及卵的显微镜计数。3.5移液器量程：200uL～1000uI.系统误差：土1.2%.随机误差士0.6%。用于精确量取线虫卵悬浮液及接种。3.6高压灭菌锅用于基质、试验用水及小型器具的消毒处理。4鉴定方法4.1田间病圃法4.1.1播种选择平均孢囊数大于30个的病.按品种适宜播期播种.每份材料2行.行长5m.每行留苗35株一50株。根据试验，每20个参鉴品种设一个感病对照。1 NY/T3059—20164.1.2调查大豆出苗后28d～35d.检测感病品种根部大豆孢囊线虫的发育情况。当大豆孢囊线虫白色雌虫突出表皮时.随机挖取10株，统计根上的孢囊数，4.2病土盆栽法4.2.1播种选择平均孢囊数大于30个的病土-掺入30%消毒后的细沙.充分混匀.放人直径为18cm、高20cm的花盆中，每盆播种大豆5粒.出苗后留苗3株.每个品种播5盆.同时设置感病对照，随机摆放：土壤采用滴灌方式补充水分：含水量控制在50%～60%。4.2.2调查大豆出苗后28d～35d.检测感病品种根部大豆孢囊线虫的发育情况。当大豆孢囊线虫白色雌虫突出表皮时·扣盆调查，统计根上的孢囊数.对所有鉴定品种逐株调查全部株系。4.3人工接种法4.3.1接种采用无线虫孢囊的土壤，掺入30%的细沙.混合后灭菌，装入直径为18cm、高20cm的花盆中备用。供试大豆在灭菌的蛭石中育苗，待大豆出苗子叶展开时，挑选根系长度一致的幼苗移裁到花盆中。移栽时，先在移栈位置每株接人1500粒卵/mL的孢囊线虫卵悬浮液5mL（孢囊线虫卵悬浮液的制备见附录B）。每盆3株，设4次重复，设置感病对照品种。鉴定在温室内完成，接种后室温保持在28℃～30℃。4.3.2调查移栽后28d～35d，检测感病品种根部大豆孢囊线虫的发育情况。当大豆孢囊线虫白色雌虫突出表皮时.扣盆调查，统计根上的孢囊数，对所有鉴定品种逐株调查全部株系。4.4重复鉴定当田间病圃鉴定为抗性以上时需进行2次室内人工接种鉴定，以进一步确定其抗性。5抗性评价5.1有效性当设置的对照品种达到其感病程度，平均孢囊附着量大于30个有效，否则为无效。5.2抗性评价标准逐株调查根系上的孢囊数日.计算平均孢囊数，按表1进行分级。表1大豆对孢囊线虫的抗性分级标准抗性评价级别分级标准IM1单株平均孢囊数为0个，植株生长正常HR3单株平均孢囊数在0.1个～3.0个之间，植株生长正常R5单株平均孢囊数在3.1个～10.0个之间.植株生长基本正常或部分矮黄s7单株平均孢囊数在10.1个～30.0个之间.植株矮小.叶片发黄，结实少HS9单株平均孢囊数在30.1个以上.植株不结实.干枯死亡5.3抗性判断根据重复抗性鉴定结果，以记载的最高发病程度，对鉴定材料进行抗病性评价，写出正式鉴定报告。并附原始资料。大豆抗抱囊线虫鉴定调查汇总表见附求（。2 NY/T3059—2016附录A(资料性附录）大豆孢囊线虫及生理小种A.1大豆孢囊线虫A.1.1形态特征大豆孢囊线虫（HeteroderuglycinesIchinohe），雌雄成虫异形又异皮。雌成虫柠檬形.先白后变黄褐，大小0