SN_T 3848-2014出口食品中茶多酚的检测方法 高效液相色谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3848—2014出口食品中茶多酚的检测方法高效液相色谱法Determination method of tea polyphenol residues in foods for export-HPLC method2014-08-01实施2014-04-09 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局森真 SN/T 3848-2014前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国东莞出人境检验检疫局检验检疫综合技术中心、中华人民共和国北京出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：付登洲、李小林、李菊、黄伟、杨雪娇、温健昌、王伟、张江锋。I SN/T 3848—2014出口食品中茶多酚的检测方法高效液相色谱法1范围本标准规定了出口食品中茶多酚的高效液相色谱检测方法。本标准适用于食用油、糕点、方便米面、油炸食品及肉灌肠中表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG)及表儿茶素（EC)的测定，不适用于茶及茶制品。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要食用油经甲醇超声提取，冷冻、离心，其他试样用正已烷提取，提取液经冷冻、离心后，高效液相色谱仪检测，外标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。4.1乙:色谱级。4.2甲醇:色谱级。4.3甲酸:色谱级。4.4表没食子儿茶素没食子酸酯标准品（EGCG）：CAS号989-51-5,分子式C22H18O11，相对分子质量458.37,纯度大于等于95%。4.5表没食子儿茶素标准品（EGC)：CAS号970-74-1，分子式C15H14O1，相对分子质量306.27，纯度大于等于95%。4.6表儿茶素没食子酸酯标准品（ECG）：CAS号1257-08-5，分子式C15H18O10，相对分子质量442.37，纯度大于等于92%。4.7表儿茶素标准品（EC）：CAS号490-46-0，分子式C15H14O6，相对分子质量290.27，纯度大于等于 97%。4.8茶多酚组分标准储备溶液：准确称取适量的 EGCG、EGC、ECG、EC标准品（精确到0.000 1g），用甲醇溶解并定容至10 mL，即得 EGCG、EGC、ECG、EC浓度分别为 0.5 mg/mL 的标准储备液，0℃～4℃下保存,有效期两周。4.9茶多酚组分混合标准工作液：根据需要分别取适量上述茶多酚组分标准储备溶液，用水稀释成适当浓度的混合标准工作溶液，现用现配。4.10微孔滤膜：0.45μm,有机相。1 SN/T 3848—20145仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器/二极管阵列检测器。5.2天平:感量为0.000 1g和0.01 g。5.3离心机:转速不低于6000 r/min。5.4旋涡混合器。5.5具塞离心管:聚四氟乙烯,10 mL。6分析步骤6.1试样制备与保存6.1.1植物油类将所取原始样品1kg在试样桶内充分混匀，再将混匀样品分装至洁净容器内密封，作为试样，并标明标记,于0℃～4℃保存。6.1.2糕点、方便米面、油炸食品取有代表性样品1kg，将样品按四分法缩至200g，在粉碎机中粉碎，再将混匀样品分装至洁净容器内密封,作为试样,并标明标记,于0℃～4℃保存。6.1.3肉灌肠取有代表性样品1kg,将样品按四分法缩至200g，所取样品经组织捣碎机捣碎，再将混匀样品分装至洁净容器内密封，作为试样，并标明标记，于0℃～4℃保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染。6.2试样处理6.2.1食用油处理称取 2g试样(精确到0.001g)于10 mL带刻度具塞离心管中,加人甲醇定容至10mL,混匀,涡旋振荡2min,超声 20 min,在一18℃冰柜中冷冻10 min，以6000 r/min 离心5 min，上清液经 0.45 μm微孔滤膜过滤，滤液供高效液相色谱仪待测。6.2.2各类糕点、方便米面制品、油炸食品等含油脂的固体样品及肉灌肠处理称取2g试样（精确到0.001g)于250mL具塞锥形瓶内，加人50mL正已烷振荡提取，用滤纸过滤至250mL圆底烧瓶中,重复 3次，合并滤液，于40℃水浴中旋转蒸发至近干，加入少许甲醇，振摇溶解提取液（必要时40℃水浴中超声溶解），移人10mL带刻度离心管中，用少量甲醇冲洗圆底烧瓶3次，洗涤液并人离心管中，定容至10mL，混勾匀、涡旋、冷冻、离心，上清液经0.45μm微孔滤膜过