NY_T 2294.1-2012细菌微生物农药 蜡质芽孢杆菌 第1部分：蜡质芽孢杆菌母药.pdf

s. 65.020.0115NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2294.1—2012a 细菌微生物农药蜡质芽孢杆菌第1部分：蜡质芽孢杆菌母药Bacterial pesticides-Bacillus cereus-Part 1 : Bacillus cereus technical concentrates(TK )12-12-24发布2013-03-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 2294. 1--2012前言NY/T2294《细菌微生物农药蜡质芽孢杆菌》为系列标准，分为两部分：第1部分：蜡质芽孢杆菌母药；2-第2部分：蜡质芽孢杆菌可湿性粉剂。本部分为NY/T2294的第1部分。本部分按照GB/T1.1给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：农业部农药检定所、中国农业大学。本标准主要起草人：袁善奎、姜辉、刘西莉、崔晓岚、黄中乔、林荣华、翟唯钢、王一喆、张宏军、王以燕。 NY/T 2294.1—2012细菌微生物农药蜡质芽孢杆菌第1部分：蜡质芽孢杆菌母药1范围本部分规定了细菌微生物农药蜡质芽孢杆菌母药的要求、试验方法、检验与验收以及标志、标签、包装、贮运。本部分适用于以芽孢为主要活性成分的粉状蜡质芽孢杆菌母药。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志GB/T1601农药pH值的测定方法GB/T1604商品农药验收规则GB/T1605商品农药采样方法GB3796农药包装通则GB/T8170--2008数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T16150一1995农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1蜡质芽孢杆菌母药Bacilluscereustechnicalconcentrates(TK）由蜡质芽孢杆菌纯菌种经发酵而获得的高含量芽孢菌粉，通常情况下还会包含伴随发酵过程的少量生物组分和化学杂质。3. 2菌落形成单位colonyforming units(CFU)是将蜡质芽孢杆菌母药用水稀释后得到的菌液通过涂布的方法，让其单个芽孢分散在琼脂平板上，待培养后每活芽孢形成-个菌落，即一个菌落形成单位(CFU)，通过肉眼观察菌落的数量来推算单位微生物农药样品中的活芽孢含量。3.3杂菌数number of microbial contamination蜡质芽孢杆菌母药样品检测中，除蜡质芽孢杆菌菌落以外的其他微生物菌落数之和。3.4杂菌率frequencyofmicrobialcontamination蜡质芽孢杆菌母药样品中除枯草芽孢杆菌外，其他菌（真菌和细菌等）量占总菌量的百分率。3.5贮存稳定性storagestability1 NY/T 2294. 1--2012蜡质芽孢杆菌母药在室温和（或）低于室温下贮存一定时间后，产品的活菌数占其标明值的相对百分率。4要求4.1外观通常为浅灰色或浅棕色粉状物，由于发酵基质的不同颜色偶有差异，但必需为均匀疏松的粉末，不可有团块。4.2指标蜡质芽孢杆菌母药质量控制项目指标应符合表1的要求。表1蜡质芽孢杆菌母药质量控制项目指标目指标项≥1. 0×1010含孢量，CFU/g3杂菌率,%pH5.0~8.0细度（通过45μm筛），%≥906干燥减量，%≥80贮存稳定性”，%为定期检验项目：3个月检测一次5试验方法除另有说明，本方法所用试剂均为化学纯及以上，所述溶液均为水溶液。5.1抽样按照GB/T1605规定进行样品的采集，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量不少于100g。采样时必须特别注意样品的代表性和避免污染，采样容器和采样工具必须经过消毒灭菌，样品采集后应立即进行检验，若不能立即检验，可贮存在4℃冰箱中。5.2菌种鉴别根据代表菌株的形态学和生理生化特征进行菌种鉴别，并可辅助脂肪酸分析、Biolog、16SrRNA基因序列分析等手段。当对鉴别结果有争议或需要进行法律仲裁检验时，应到具有菌种鉴定资质的.单位，将待检菌株与模式菌种进行比对，出具菌种鉴定报告，作为仲裁依据。有效成分的特征参见附录A。鉴别方法见附录B。5.3含孢量测定5.3.1方法提要采用平板菌落计数法，即将母药润湿、稀释后，均勾涂布在培养基平板上，待各芽孢菌体形成菌落后，统计菌落总数，以单位样品（g)中的菌落形成单位数（CFU)表示活芽孢含量（CFU/g）。5.3.2试剂和溶液试剂:Tween-20或TritonX-100;溶液:0.05%Tween-20或0.05%TritonX-100。5.3.3仪器、设备天平