NY 405-2000脱毒大蒜种蒜（苗）病毒检测技术规程.pdf

B 15NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 405--2000脱毒大蒜种蒜（苗）病毒检测技术规程Rules for yirus detection of virus-free seed (seedling) garlic2000 - 09- 22 发布2000-12-01实施中华人民共和国农业部‧发 布 NY/T 405—2000前言为了有效地实施对脱毒大蒜种蒜质量检验和管理，规范脱毒大蒜种蒜市场，促进大蒜脱毒技术的推广,实现脱毒大蒜种蒜(苗)病毒检测的规范化、标准化,特制定本规程。本规程在参照国内外大蒜病毒检测技术最新研究进展的基础上，结合当前国内生产实际，力求达到快速、准确、可操作性强的检测要求。检测对象主要选择生产上发生分布范围广、危害性大的病毒。检测方法主要采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测方法。本规程内容包括脱毒大蒜种蒜(苗)检测的适用范围、检测对象、抽样方法、检测方法和质量要求。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准主要起草单位：农业部植物脱毒种苗质量监督检验测试中心(济南)、山东省植物保护总站。本标准主要起草人：李明立、孙作文、杨勤民、刘敬东、商明清、卢增全。 中华人民共和国农业行业标准脱毒大蒜种蒜(苗)病毒检测技术规程NY/T 405—2000Rules for virus detection of virus-free seed (seeding) garlic1范围本标准规定了脱毒大蒜种蒜(苗)的病毒检测方法和操作规程。本标准适用于脱毒大蒜种蒜(苗)的病毒检测。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。NY/T 40i—2000　脱毒马铃薯种薯(苗)病毒检测技术规程3 定义本标准采用下列定义。3.1脱毒苗应用茎尖组织培养技术获得的再生试管苗，经检测确认不带洋葱黄矮病毒(OYDV)、大蒜普通潜隐病毒(GCLV),才确认是脱毒苗。3.2脱毒种蒜从繁殖脱毒苗开始，经逐代繁殖增加种蒜数量的种蒜生产体系生产出来的。分原原种、原种、生产用种三个级别。3.2.1原原种　 pre-elite用脱毒苗在防虫网室、温室条件下生产出的符合质量标准的种蒜。3.2.2原种‘elite用原原种作种蒜，在良好隔离条件下生产出的符合质量标的种蒜。3.2.3 生产用种 certified seed用原种作种蒜,在隔离条件下生产出的符合质量标准的种蒜。3.3 病毒病株允许率脱毒种蒜繁殖田中病毒病株的允许比率。4 检测对象洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarf virus,OYDV);大蒜普通潜隐病毒(Garlic common latent virus,GCLV)。5 抽样5.1组培苗抽样5.1.1脱毒核心材料;每株必须检测。中华人民共和国农业部2000-09-22批准2000-12-01实施1 NY/T 405—20005.1.2扩繁苗：随机抽取1%～2%的扩繁苗检测。5.2田间抽样5.2.1原原种和原种抽样;大蒜生长前、中、后期,在目测全田的基础上,采用五点取样法,抽样数量为0.1 hm²以下200 株;0.11～1 hm500 株;超出1 hm²面积,划出另一检验区,按本规程规定面积取样。每株取叶片1～5g，低温保湿存放待检。5.2.2生产用种抽样：抽墓前一周,在目测全田的基础上,采用随机取样法,0.1 hm²以下检验2点,每点100株；0.11～1hm²检验5点，每点100株；1.1～5hm²检验10点，每点100株；超出5hm²面积,划出另一检验区,按本规程规定的面积取样。取样方法及样品保存同5.2.1。5.3商品种蒜抽样没有经过田间检验的商品种蒜必须进行鳞茎检验。5.3.1根据种蒜不同存放方式，采用分层设点或随机取样的方法，抽样数量见表1。表1种蒜抽样数量标准表抽样最低数量，kg抽样百分率,%种蒜总量，kg6~10≤10 000100. 3~510 000注：不足抽样最低数量的全部作为混合样品。5.3.2将第一次抽取的样品混合后进行二次抽样，随机抽取10%的混合样品检测。6 检测方法双抗体夹心酶联免疫吸附检测法(DAS-ELISA)按NY/T401-2000中附录A的方法执行。7质量要求凡酶联免疫检测呈阳性反应的为带毒种蒜。原原种:病毒病株允许率为 0。原种:病毒病株允许率≤2%。生产用种:病毒病株允许率≤10%。 000--20 /N中华人民共和国农业行业标准脱毒大蒜种蒜(苗)病毒检测技术规程NY/T 405--2000*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售版权