SNT 1751.1-2006动物源性食品中喹诺酮类药物残留量检测方法 第1部分：微生物抑制法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1751.1—2006动物源性食品中喹诺酮类药物残留检测方法第1部分：微生物抑制法Determination of quinolone residues in animal derived food--Part 1 : MIA method2006-01-26 发布2006-08-16 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪” 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准动物源性食品中喹诺酮类药物残留检测方法第 1部分:微生物抑制法SN/T 1751. 1—2006中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷字数 22千字开本 880×12301/16　印张１2006年5月第－一次印刷2006年5月第一版印数 1—2 000* SN/T 1751. 1—2006前言SN/T1751《动物源性食品中喹诺酮类药物残留检测方法》分为二个部分：-第1部分：微生物抑制法；第2部分：高效液相色谱法。本部分是SN/T1751的第1部分。本部分的附录 A是规范性附录。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检疫局起草。本部分主要起草人：黄晓蓉、郑晶、杨方、李寿崧、李耀平、高旗利。本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标。 SN/T 1751. 1—2006动物源性食品中喹诺酮类药物残留检测方法　第1部分：微生物抑制法1范围SN/T1751的本部分规定了动物源性食品中喹诺酮类药物残留检测的试样制备、保存和微生物抑制检测方法。本部分适用于肉类、蛋、鱼和虾中的喹诺酮类药物残留筛选检测，阳性结果须用其他方法进行确证。2规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T1751的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法SN/T0169出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法3试样制备和保存3.1试样制备肉、鱼和虾：从原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放人高速捣碎机均质，充分混勾，用四分法缩分不少于500g试样。装人清洁容器内，并标明标记。蛋：从原始样品中，随机分出一半(不少于500g)，鲜蛋需去壳。将蛋黄和蛋白于混合器中充分混勾，装人清洁容器内，作为试样，并标明标记。制样操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。3.2试样保存肉、鱼、虾和蛋：试样于一18℃以下保存。4测定方法4.1方法提要试样经缓冲液提取、温育和离心后，取上清液进行测定。利用抗生素对感菌的抑制作用来判别试样中是否含有抗生素。4.2设备和材料4.2.1恒温箱：30℃±1℃，隔层保持水平。4.2.2离心机。4.2.3高速组织捣碎机。4.2.4恒温水浴锅。4.2.5涡旋振荡器。4.2.6游标卡尺：测量范围0mm～~200mm,精度0.02mm或抑制圈测量仪。4.2.7灭菌平皿:直径 90 mm,底部平整的玻璃或一次性塑料灭菌平皿。4.2.8牛津杯:外径7.8 mm±0.1 mm,内径6 mm±0.1 mm,高度10 mm±0.1 mm。 SN/T 1751. 1—20064.2.9可调移液器:10 μL～~100 μL,100 μL～1 000 μL。4.3试剂和材料4.3.1菌种大肠杆菌 Escherichia coli ATCC8739。4.3.2培养基保存及传代用细菌培养基：见第A.1章。增菌用液体培养基：见第A.2章。检定用培养基见第A.3章。4.3.3 试剂本方法所用化学试剂为分析纯：试验用水为蒸馏水、去离子水，试验用水应符合GB/T 6682的规定。pH8.0磷酸盐缓冲液：称取 0.523g,磷酸二氢钾（KHzPO,）及16.73g磷酸氢二钾4.3.3. 11（K,HPO.），用蒸馏水溶解并定容至1000mL，121℃高压灭菌.15min。恩诺沙星标准储备液：称取10mg恩诺沙星标准品，用0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并定容至 1 000 μg/mL,置 2℃～8℃冰箱中保存,贮存期 30 d。恩诺沙星标准工作液吸取一定量的恩诺沙星标准储备液，用pH8.0磷酸盐缓冲液稀释成0.05μg/mL的标工作液，须当日配制使用。4.4测定步骤4.4.1样液提取称取10g均质好的试样于50mL离心管中，加人pH8.0磷酸盐缓冲液10mL，用涡旋振荡器充分振荡3min，于70℃～75℃水浴保温20.m