SN 0854-2000进出口蜂王浆及蜂王浆冻干粉中10-羟基-α-癸烯酸的检验方法.pdf

SN中华人民共和国出人境检验检疫行业标准SN/T 0854—2000进出口蜂王浆及蜂王浆冻干粉中10-羟基-α-癸烯酸的检验方法Method for the determination of10-hydroxy-α-decenoic acid in royal jellyand royal jelly powder for import and export2000-06-22发布2000-11-01实施中华人民共和国国家出人境检验检疫局发布 SN/T0854-2000前言本标准是按照GB/T1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标准编写的基本规定》的要求对ZBX830031987《出口蜂王浆和蜂王浆干粉中10-羟基-α-癸烯酸的测定方法》进行修订的。本标准在技术上与ZBX83003-1987基本致，仅增补了抽样与制样方法。本标准从实施之日起，同时代替ZBX83003-1987。本标准的附录A是标准的附录。本标准由中华人民共和国国家出人境检验检疫局提出并归口。本标准主要起草单位：中华人民共和国湖北出人境检验检疫局，本标准主要起草人：刘德馨、孙保国、林雁飞。 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口蜂王浆及蜂王浆冻干粉中SN/T 0854—200010-羟基-α-癸烯酸的检验方法代替ZBX83003-1987Method for the determination of10-hydroxy-α-decenoic acid in royal jellyand royal jelly powder for import and export1 范围本标准规定了进出口蜂王浆、蜂王浆冻于粉检验的抽样和液相色谱检验方法。本标准适用于进出口蜂王浆及蜂王浆冻干粉中10-羟基-α-癸烯酸(10-HDA)的检验。2抽样与制样2.1检验批以一报验批为一检验批，每一检验批蜂王浆不多于1 t,蜂王浆冻干粉不多于250 kg。同一检验批商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格、等级等。2:2抽样数量批量，件抽样量,件51～50.751~100.101002.3抽样方法按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启，从每件内抽取1罐（袋），每罐（袋）取约50.g，作为原始样品。2.4制样方法原始样品总量不得少于200g，采用4分法，将样品分为两等份，加封后，标明标记，一份留存，另一份供检验。2.5试样保存2.5.1.试样宜及时检验。2.5.2在不能及时检验的情况下，应将试样于一18℃以下冷冻保存。注：在抽样和制样的操作过程中必须防止样品受到污染和发生含量的变化。3检验方法3.1方法原理试样经乙醇处理，溶出10-HDA并沉淀蛋白质，加入内标后用乙醇定容，经离心或放置过夜，直接取上层清液测定。3.2试剂和材料中华人民共和国国家出入境检验检疫局2000-06-22批准2000-11-01实施1 SN/T0854---2000除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。3.2.1甲酵，紫外光谱纯或优级纯。3.2.2°无水乙醇；优级纯。3.2.3乙醇：95%，优级纯。3.2.4内标物：对羟基苯甲酸甲酯。3.2.510-HDA标准品：99.0%以上（GSBx31001-88原潮北进出口商品检验局研制）。3.2.610-HDA标准溶液：每癌升含1.0mg。称取0.025.0.g置于抽真空硫酸干燥器内放置24h的10-HDA，称准至0.0001g，溶于无水乙醇，移入25mL容量瓶中，用无水乙醇定容。3.2.7内标溶液：每毫升含0.65mg。称取.0.650g内标物（准确至0.0002g），溶于无水乙醇，移人1000mL容量瓶中，用无水乙醇定容。3.2.8盐酸溶液：0.01mol/L。3.2.9流动相：甲醇-0.01mol/L盐酸溶液（55+45)。3.3仪器和设备3.3.1高效液相色谱仪：带紫外检测器，记录仪或微处理机。3.3.2 色谱柱:150 mmX4 mm Nova-Pak Cis柱,4 μm。3.4分析步骤3.4.1蜂王浆：试样解冻至室温，用玻璃棒充分搅匀，称取0.5g样品，准确至0.0002g，加2mL0.01mol/L盐酸溶液，搅匀，加7mL乙醇搅匀，移人50mL容量瓶中，加25mL乙醇，加10.0mL内标溶液，用乙醇定容，立即在超声波浴上混合15min或在漩涡混匀器上混合15min，取出在3000r/min离心10min或放置冰箱中过夜等测定。3.4.2蜂王浆冻干粉：试样解冻至室温，称取0.16g，准确至0.0002g，置于25mL烧杯中，加人预先混合好的溶液（含乙醇6mL，0.01mol/L盐酸溶液2mL），搅匀，移人50mL容量瓶中，加10.0mL内标溶液，用乙醇定容。超声或漩涡混匀等以下步骤同3.4.1。3.4.3色谱