SN 0276-1993《出口禽肉中氨丙嘧吡啶残留量检验方法》.pdf

中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN 0276--93出口禽肉中氢丙嘧吡啶残留量检验方法薄层色谱法Method for the determination ofamprolium residues in poultry meat for export-Thin layer chromatography1993-12-28发布1994-05-01实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发布 中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口禽肉中氨丙吡啶残留量检验方法SN 0276--93薄层色谱法Method for the determination ofamprolium residues in poultry meat for exportThin layer chromatography主题内容与适用范围本标准规定了出口禽肉中氨丙嘧吡啶残留量的抽样、制样和薄层色谱测定方法。本标准适用于出口鸡肉中氨丙嘧吡啶残留量检验。2抽样和制样2.1 检验批以不超过2500件为一检验批。一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。2.2抽样数量批量，件最低抽样数，件11~2526～100510101～250251～5001517501~1 0001 001~2 500202.3抽样方法按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品，原始样品总量不少于2kg。放入洁净容器内，加封后，标明标记、及时送交实验室。2.4试样制备从每袋原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放入高速组织捣碎机中捣碎均匀，充分混含，用四分法缩分出不少于500g。装入洁净容器内，加封后标明标记。2.5试样保存将试样于18℃以下冷冻保存。注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。3测定方法3.1方法提要用三氯乙酸溶液提取试样中的氨丙嘧吡啶。提取液经碱性氧化铝柱净化，用氯化钾盐酸溶液洗脱中华人民共和国国家进出口商品检验局1993-12-28批准1994-05-01实施1 SN 0276-93后，在碱性条件下加人硝酸银和铁氰化钾溶液，使衍生成荧光物质，于薄层板分离，用薄层扫描仪测定。3.2试剂和材料所用试剂除注明外，均为分析纯，水为蒸馏水。3.2.1三氯乙酸溶液：5%。称取5g三氯乙酸,溶于100mL水中。3.2.2氯化钾盐酸溶液：25%。称取25g氯化钾，溶于0.1mol/L盐酸使成100mL。如析出结晶，则加温使之完全溶解。3.2.3铁氰化钾溶液：2%。称取2g铁氰化钾CK;Fe(CN)。),溶于100mL水中。转移至棕色瓶中，于冰箱中保存。3.2.4硝酸银溶液：2%。称取2g硝酸银，溶于100mL水中。转移至棕色瓶中，于冰箱中保存。3.2.5氢氧化钠溶液：30%、10%。称取30g、10g氢氧化钠，分别溶于100mL水中。3.2.6异丁醇：优级纯。3.2.7氧化铝：碱性，层析用，100~200目。3.2.8无水硫酸钠：650℃灼烧4h，置干燥器内备用。3.2.9²高效薄层板：薄层层析用硅胶G板，5cm×10cm、10cm×10cm，层厚0.25mm。3.2.10展开剂：吡啶-异丁醇-水（66十17十17）。3.2.11氮丙嘧吡啶标准品：纯度≥99%。3.2.12氨丙吡啶标准溶液：精确称取氨丙嘧吡啶标准品10.0mg于小烧杯中，用水溶解，转移至500mL容量瓶中，稀释定容。此做为标准储备溶液，浓度为20.0μg/mL。用移液管移取此溶液5mL于另一容量瓶中,加水稀释至500mL。此为标准工作溶液，浓度为0.2μg/mL。3.3仪器和设备3.3.1荧光分光光度计，配有薄层扫描装置，或薄层扫描仪。3.3.2高速组织捣碎机。3.3.3振荡器：往复式。3.3.4 离心机:3 000 r/min。3.3.5旋转蒸发器。3.3.6紫外灯：100~125W，滤光片365nm。3.3.7层析缸。3.3.8自动点样仪。3. 3. 9微量注射器:5 μL、10μL~20 μL、50 μL锥形瓶具塞，250mL。3. 3. 103.3.11离心管：具塞带刻度,50 mL。3.3.12基筒:50 mL、100mL。3.3.13蒸发皿l:50 mL、100 mL。3.3. 14层析柱:20 cmX1cm(id)玻璃柱，下具活塞。底部装少许脱脂棉，装约 3～5g 碱性氧化铝。3.3.15恒温水浴锅。3.3.16瓷研钵。3.3.17样品瓶：棕色，3mL。3.4测定步骤3.4.1提取和净化取经绞碎混匀的试样20g（精确到0.1g)于瓷研钵中，加40g无水硫酸钠，研磨脱水，转移至250mL锥形瓶中。准确加入三氯乙酸溶液60mL，于振荡器上提取30min。移取上层试液于50mL离心管中,以3000 r/min 离心5 min。准确吸取